Бса в порошке как пить: Как правильно принимать BCAA: в порошке, капсулах, таблетках

BCAA как принимать в порошке * Как пить BCAA правильно и сколько, дозировка БСА * БЦА

Сейчас мы с вами обсудим то, как употреблять БЦАА в порошке, какие особенности имеет эта форма, а также, по какому графику их следует принимать. Есть определенные правила, соблюдая которые, вы сможете многократно повысить эффективность употребления BCAA. Многие употребляют эту добавку неправильно или просто экономят, намеренно занижая дозировку. Но для таких случаев применимо выражение «скупой платит дважды», так как, употребляя незаменимые аминокислоты в слишком низких порциях, вы рискуете вообще не ощутить никакого эффекта и потратить деньги зря.

Начнем с того, что BCAA – это один из основных компонентов мышечной ткани. Являясь незаменимыми аминокислотами, эта троица напрямую контролирует скорость и качество роста мышц. То количество, которое поступает в наш организм с едой слишком мало для атлетов, и поэтому их дополнительное употребление в виде добавки способно существенно улучшить ваш прогресс.  А вот если вы превысите суточно-рекомендуемую дозу в несколько раз, для вас это не выльется в виде каких-то проблем и недомоганий. Поэтому можно использовать правило – чем больше, тем лучше.

Как пить БЦАА в порошке правильно в дни тренировок и отдыха?

Чтобы ответить на вопрос, как принимать БСА в порошке в дни тренировок, нужно понимать алгоритм их работы в организме. Сами по себе эти аминокислоты являются качественным энергетическим ресурсом, который позволит организму не тратить собственную мышечную ткань, для выработки энергии. Кроме того, они обладают антикатаболическим воздействием, и стимулируют рост мышечной ткани. Из этого следует, что их употребление особенно эффективно как до, так и во время, и после тренировки.

Предтреник не работает!? Все ответы о том, как правильно принимать предтренировочный комплекс ЗДЕСЬ!

Помимо этого, если речь идет о мужчинах, то употребляться BCAA должны в пять приемов, по 5-6 г на каждый. Еще два приема – это сразу после пробуждения, и перед сном. Таким образом, вы загружаете организм необходимыми аминокислотами, чтобы он не «голодал» во сне, и получил необходимые питательные вещества сразу после пробуждения.

У девушек немного по-другому – так как им нужно всего 20г BCAA в день, то можно разделить на 4 приема по 5 г. Если выбирать время для употребления между утром и вечером, то гораздо эффективнее будет пить именно утром. Во сне организм не слишком эффективно усваивает питательные вещества. Выпив БЦАА сразу после пробуждения, вы разбудите как свой организм, так и его метаболизм, и дадите ему энергию, которая не поступала в течение ночи.

В дни отдыха девушкам будет достаточно 3 приёмов, а мужчинам – 4: утром, 1-2 раза между приёмами пищи и перед сном.

Важно! Хотите принимать спортивное питание с гарантией результата? Тогда советуем узнать, как правильно принимать спортпит ТУТ.

Дозировка BCAA в порошке

Всё ещё думаете, стоит ли принимать БЦАА? Тогда советуем вам узнать, какая польза BCAA и оценить все плюсы приёма незаменимых аминокислот!

Итак, теперь вы наверно и сами сможете ответить нуждающимся, как пить БСА в порошке. Но есть и еще один момент, о котором следует рассказать. BCAA – это три аминокислоты, и их концентрация, особенно в порошках, различна. Наиболее популярным является вариант 2:1:1, где наибольшее внимание уделяется лейцину, как самой «сильной» среди остальных двух.

Одна порция порошковых БЦАА, как правило, содержит порядка 5-8 г этих аминокислот. Конечно, употребляя по 40 г в день, вы не навредите своему организму, но и пользы слишком сильной от этого тоже не будет. Все хорошо в меру, и даже такие полезные вещества, как BCAA, не могут усваиваться в слишком больших количествах.

Важно! Самой оптимальной дозировкой считается: от 20 г в день для девушек, от 30 г в день для мужчин.

Как принимать БЦАА в порошке – график

Для того чтобы вам постоянно не пришлось искать как пить BCAA в порошке, мы составили для вас удобный график:

Лучшие варианты БЦАА

Какой спортпит принимать вместе с БЦАА?

ВСАА – хоть и одна из важнейших добавок, но она работает полноценно только в комплексе с другим спортивным питанием. Базовый набор спортивного питания для набора массы и сушки, женщин и мужчин, а также разных видов спорта существенно отличаться не будет. В ваш комплекс, помимо незаменимых аминокислот, также должны войти:

• Витамины и минералы;
• Жирные кислоты;
• Протеин;
• Предтренировочные комплексы.

Витамины

Жирные кислоты

Протеин

Предтренировочные комплексы

Надеемся, что теперь вы точно знаете, как правильно принимать BCAA в порошке и какой продукт лучше купить! Ну, а если у вас остались вопросы или дополнения, то ждём их в комментариях!

Понравилась статья? Поделиться с друзьями:

MUTANT BCAA 9.7 от Mutant (bcaa) описание, состав, как принимать

MUTANT BCAA 9.7 от Mutant обеспечивают вас 9,7 граммами аминокислот в одной мерной ложке. Наши BCAA в предпочтительном соотношении 2:1:1 подвергнуты обработке для превосходной растворимости, с добавлением микронизированных аминокислот и обогащены магнием для улучшения синтеза протеина. Также мы добавили электролиты для поддержания водно-солевого баланса и экстракт черного перца для лучшего усвоения смеси.

MUTANT BCAA — за гранью обычных BCAA!

— 7,2 грамм BCAA в каждой порции

— 8 электролитов для того, чтобы ваши мышцы были насыщены водой

— BioPerine ускоряющий усвоение

— Смесь аминокислот поддерживающих восстановление

— Не содержит сахара

— Изумительный вкус

Состав питательных веществ в одной порции (1 мерная ложка — 11,6 гр.) продукта**:  

• Калории — 0
• Всего жиров — 0 гр.
• Всего углеводов — 0 гр.
• Соль — 0,01 гр.
• Магний — 50 мг.
• Протеин — 9,7 гр.
• Смесь Mutant BCAA — 9,7 гр.

— Быстрорастворимые BCAA в соотношении 2:1:1 — 7,2 гр.

L-лейцин, L-валин, L-изолейцин

— Поддерживающая смесь — 2,5 гр.

таурин, глицин, L-глютамин, L-аргинин, L-тирозин

• Смесь 8 электролитов — 120 мг.

оксид магния, цитрат калия, цитрат натрия, трикальция фосфат, лактат кальция, бикарбонат натрия, цитрат кальция, хлорид натрия

• Агент ускоряющий усвоение BioPerine — 5 мг.

черный перец (плоды) (98% пиперина)

Другие ингредиенты**: яблочная кислота, модифицированный крахмал, лимонная кислота, ацесульфам калия, сукралоза, диоксид кремния, краситель Brilliant Blue FCF, краситель Tartrazine, соевый лецитин, натуральные и искусственные ароматизаторы. Возможно содержание молока, пшеницы, яиц, арахиса, сои, орехов (фундук).

Рекомендации по применению: смешайте 1 мерную ложку (11,6 гр.) MUTANT BCAA 9.7 с 250-500 мл. холодной воды, хорошо размешайте и пейте во время тренировки или в течение всего дня. Не превышайте рекомендуемую дозировку. Продукт не должен использоваться, как замена полноценного питания. Прекратите прием продукта, если почувствуете отклонения от нормального состояния здоровья.

Порций в упаковке: 30.

Противопоказания: индивидуальная непереносимость компонентов продукта, беременным и кормящим женщинам, лицам до 18 лет. Перед применением проконсультироваться с врачом.

Примечание: не является лекарством.

Условия хранения: хранить вдали от прямого попадания солнечных лучей, в сухом, прохладном месте, недоступном для детей.

Срок годности: смотреть на упаковке. 

Изготовитель: Mutant, 101-1551 Broadway Street, Port Coquitlam, BC, Canada V3C 6N9.

* описание предоставлено производителем продукта.

** состав питательных веществ и ингредиентов, а также вес одной порции и вес самого продукта может незначительно меняться в зависимости от вкуса продукта.

Просроченное спортивное питание можно ли принимать? Срок годности спортивного питания

Спортивное питание, как и любой другой продукт, имеет определенный срок годности. Однако, нередки случаи, когда спортпит просто нет времени выпить, а выбрасывать дорогостоящий продукт совсем не хочется. Именно поэтому все чаще спортсмены задаются вопросом о том, можно ли пить просроченное спортивное питание и к чему это может привести?

Срок годности спорпита: что нужно знать?

Все продукты спортивного питания можно условно разделить на три группы в зависимости от срока годности:

• К первой стоит отнести скоропортящиеся продукты, в частности, все жидкие смеси, которые уже готовы к употреблению. Выпивать их необходимо сразу же, в течение того срока, что указан на упаковке. Длительному хранению они не подлежат.
• Вторая группа – это жидкие, таблетированные, порошковые и капсулированные продукты. Главным условием их правильного содержания является сухое и темное место, с температурой от +5 до +23⁰С. В некоторых случаях, например, если это рыбий жир, полиненасыщенные кислоты в капсулах, рекомендовано хранение в холодильнике.
• Третья группа – витамины и разнообразные минеральные комплексы. Хранить их нужно с соблюдением тех же условий, что и для предыдущих групп, однако они имеют более длительный период хранения.

Стоит понимать, что все производители гарантируют высокую эффективность товаров (в частности, порошковых протеиновых коктейлей, гейнеров, БЦАА и пр.) в последний день сроки годности. Спустя несколько дней или даже недель продукт не испортится, и уж точно не принесет вреда организму. Согласно некоторым исследованиям, продукты сохраняют свою эффективность в течение 2 лет после истечения срока годности. Данный показатель зависит от класса, качества обработки. Более детальные данные в зависимости от группы спортивного питания представлены ниже.

к содержанию ↑

Просроченный протеин: как с ним быть?

Протеин является одним из самых распространенных продуктов спортивного питания. Его принимают для различных целей: во время сушки для предотвращения процессов катаболизма, для похудения, для прироста мышечной массы.

Протеиновые коктейли в сухом виде будут не только в порядке, но и эффективны даже по истечению 12 месяцев после истечения даты, указанной на упаковке. Более того, чтобы добавить гарантий, их рекомендуется хранить в плотно закрытой упаковке и в сухом, прохладном месте.

к содержанию ↑

Аминокислоты, а также витамины и минералы с просрочкой

Аминокислоты, так же как и минералы, витамины в виде капсул и таблеток после того, как наступил конечный срок использования, указанный на упаковке, имеют максимальный эффект в течение около 2 лет. Данный факт касается тех товаров, которые выпускаются в таблетированном и капсулированном виде. Порошки аминокислот можно, как и протеины, хранить до года после просрочки.

Если же речь идет о полиненасыщенных кислотах, рыбьем жире, которые выпускаются в жидком виде в капсулах, они отличаются меньшей стабильностью. Хранить их рекомендуется в холодильнике. После последнего дня годности их рекомендуется принимать не более 6 месяцев.

к содержанию ↑

Просроченные l-карнитин, гейнеры и жиросжигатели

Карнитин и другие жиросжигатели будут эффективными до 2 лет после просрочки. Это же касается и гейнеров (при правильном хранении в сухом месте все порошки останутся эффективными даже после истечения срока годности как минимум 1-1,5 года).

Подводя итоги о просрочке спортпита

Просроченное спортивное питание вовсе не обязательно сразу же выбрасывать. Большинство продуктов при соблюдении условий хранения имеют ту же эффективность. Именно поэтому становятся все более актуальными категории уцененных товаров, в которых представлены товары с подходящим к концу или уже истекшим сроком годности.

МОЖНО ЛИ УПОТРЕБЛЯТЬ СПОРТИВНОЕ ПИТАНИЕ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ?

Существует ошибочное мнение, что беременная женщина должна прекратить занятия в зале и полностью отказаться от спортивного питания. Но, по мнению врачей, умеренные физические нагрузки пойдут будущим мамам только на пользу. При этом, не стоит забывать, что при занятиях спортом женщине необходимы дополнительные витамины и минералы, чтобы поддержать организм изнутри. Поэтому правильное питание, в том числе и спортивное, должно сопровождать женщину до, во время и после тренировок.

Если в обычном режиме Вы принимали жиросжигающие и предтренировочные добавки, то на время всей беременности и в период лактации от них следует отказаться. Также стоит исключить все кофеиносодержащие продукты, в том числе, кофе и гуарану, и продукты, увеличивающие секрецию гормонов щитовидной железы. Лишние нагрузки на ЦНС и внутренние органы, а также более серьезные осложнения, вам в этот период совершенно ни к чему.

Ответ на вопрос, можно ли пить протеин при беременности, нам задают довольно часто. Поскольку протеин обычно рассматривается как значимое питательное вещество, был проведен ряд медицинских исследований о влиянии белка на плод. Мета-анализ 20 отдельных исследований показал – от потребления белка напрямую зависит вес ребенка при рождении. Младенцы, матери которых во время беременности употребляли в пищу требуемое количество белка (норма колеблется в пределах 60-70г белка в сутки, в зависимости от индивидуальных показателей веса и состояния организма по показаниям лечащего врача), имели нормальный вес при рождении. Новорожденные с весом ниже нормы могут быть слабыми и больными, для них высока степень риска возникновения таких проблем, как низкий иммунитет, желтуха и респираторный дистресс-синдром.
Получается, что белок необходим как матери, так и растущему внутри неё ребенку. Беременная женщина должна получать свою норму белка каждый день, особенно во время второго и третьего триместров, чтобы помочь ребенку расти и снизить вероятность осложнений в этот период.
Конечно же, белки можно получать в том числе и из обычной пищи, но, если женщина не является заядлым мясоедом, протеиновый коктейль может оказаться единственным способом удовлетворения потребностей организма в белках. Главное, чтобы в состав протеинов не входили никакие вкусо-ароматические добавки: подсластители, ароматизаторы и красители, поскольку именно они могут вызвать нежелательные реакции организма, даже если раньше у Вас ничего подобного не наблюдалось. А отсюда вывод — беременной женщине можно:

• чистый протеин без каких-либо вкусовых и ароматических добавок или вкуса Ваниль, лучше всего монокомпонентный, например, Whey Protein Unflavored, Whey Protein Ваниль, Casein Ваниль, Egg Protein Ваниль,Whey Isolate Unflavored, Whey Isolate Ваниль;
• BCAA в порошке без каких-либо вкусовых и ароматических добавок и не более 1 порции в день, например, BCAA RPS Nutrition Unflavored.

Если раскрыть чуть подробнее, чем же грозит недостаток белка в организме беременной женщины, скажем, что употребление протеиновых добавок беременной женщине поможет избежать ряда неприятностей, вроде:

• катаболизма, когда от нехватки белка организм разрушает собственные мышцы;
• сбоев в работе внутренних органов вследствии нарушений функционирования желез внутренней секреции и ухудшения гормонального фона все из-за той же нехватки белка;
• потери упругости и эластичности кожи вследствие нехватки коллагена;
• нарушений в обменных процессах организма, что грозит ростом жировых отложений на фоне снижения мышечной массы;
• измотанного внешнего вида вследствие проблем с ногтями и волосами.

Избежать всего вышеперечисленного можно, обеспечив свой организм достаточным количеством белка. Конечно, не стоит в такой важный период жизни употреблять дешевое питание сомнительного качества, ведь не каждый производитель чистоплотен в отношении честного состава своей продукции.

Совершенно необходимой и ничем не заменимой добавкой в период беременности и лактации являются Омега-3 жирные кислоты, которые участвуют не только в поддержании здоровья самой женщины, но и благоприятно влияют на формирование нервной системы ребенка. Найчные исследования влияния Омега-3 на плод во время беременности выявили тот факт, что дети матерей, которые получали 1-2г Омега-3 из рыбьего жира имели в детском возрасте более высокий IQ. В Omega-3 RPS Nutrition очень удобный- компактный размер капсул, поэтому вы не будете испытывать дискомфорта при глотании.

И, несмотря на все вышесказанные преимущества употребления достаточного количества полезных веществ, мы настоятельно рекомендуем самостоятельно не употреблять во время беременности ничего специфического, в том числе и спортивного питания, не получив на то одобрение акушера-гинеколога, ведущего Вашу беременность.

К списку новостей

Для чего нужны BCAA и как их принимать, польза и вред, отзывы

Для гармоничного развития тела, хороших результатов и устойчивого прогресса спортсмену необходимо не только крайне внимательно относиться к своему рациону, но и не пренебрегать специальными спортивными добавками. Рекордную популярность среди атлетов приобрели так называемые незаменимые аминокислоты ВСАА.

Все незаменимые аминокислоты чрезвычайно важны для человека, однако именно комплекс БЦАА имеет огромное значение для спортсменов. Главное — знать, как правильно принимать BCAA, чтобы сделать тренировки более эффективными, а результаты более наглядными.

Особенности незаменимых аминокислот

В организме человека насчитывается более двух десятков аминокислот, каждая из которых выполняет определенную функцию. Все их можно разделить на две группы: заменимые и незаменимые аминокислоты. Первые синтезируются организмом, а вторые могут поступать только с продуктами питания и специальными пищевыми добавками.

Именно во второй группе выделяется 3 аминокислоты, которые отличаются от других разветвленной молекулярной структурой – валин, лейцин и изолейцин, объединенные термином BCAA (от англ. Branched-Chain Amino Acids). По-русски произносится «БЦАА» или просто «БЦА».

Для чего нужны BCAA

Их действие весьма многогранно, поэтому они с успехом применяются спортсменами в разных целях.

Для роста мышц

Аминокислоты BCAA являются основным материалом для построения новой мышечной ткани. Они составляют более чем треть всех аминокислот в мышцах. У людей, не занимающихся спортом и не преследующих цель наращивания мышечной массы, потребность в этих аминокислотах покрывается за счет поступления из белка, входящего в ежедневный рацион.

При условии регулярных силовых тренировок запасы аминокислот быстро истощаются и, чтобы создать условия для эффективного восстановления и роста мышечных волокон, необходимы дополнительные источники их поступления. Таким образом, прием БЦА для набора мышечной массы приближает спортсмена к желаемой цели.

В качестве источника энергии

При силовых нагрузках в организме запускаются процессы окисления, высвобождающие глюкозу – источник энергии, необходимой для качественной тренировки. Плохо, что для этого организму приходится разрушать собственные мышцы, запуская катаболический процесс. Дополнительный прием BCAA тормозит катаболизм и поставляет лейцин, еще один мощный энергетик. А поскольку он работает по пути, отличному от глюкозы, у организма появляется целых два источника энергии при минимальном уровне катаболизма.

Для синтеза глютамина

BCAA — это ресурс для синтеза глютамина, еще одной аминокислоты, без которой невозможен качественный тренинг и восстановление. Вот к чему приводит дефицит глютамина:

1. Перетренированность;
2. Снижение иммунных функций;
3. Снижение выработки гормона роста;
4. Активизация катаболических процессов.

Достаточное количество валина, лейцина и изолейцина помогают синтезировать необходимый спортсмену глютамин прямо в мышцах.

Для жиросжигания

Аминокислоты BCAA стимулируют выработку таких гормонов как инсулин и лептин. С инсулином все более-менее понятно — он регулирует уровень глюкозы, контролирует аппетит и участвует в обменных процессах. Лептин — еще более сложный гормон, невероятно важный для человека, стремящегося к похудению.

Чем больше в организме жировых клеток, адипоцитов, тем выше уровень лептина. Как только человек меняет свой привычный рацион, снижает потребление углеводов, уменьшает суточную калорийность и подключает физические нагрузки, уровень лептина резко тает, что приводит к повышению аппетита и замедлению обмена веществ. То есть без этого гормона организм делает все, чтобы сохранить и приумножить свои жировые запасы. Лейцин восстанавливает уровень лептина в организме, что делает прием BCAA для похудения крайне важным.

Действенность этих незаменимых аминокислот подтверждена многочисленными исследованиями и научными работами. Производители спортивного питания часто предлагают продукцию, необходимость применения которой достаточно сомнительна, но комплекс из лейцина, изолейцина и валина действительно помогает значительно улучшить свои показатели. Источник энергии и силы, быстрое восстановление, наращивание сухой мышечной массы и помощь в жиросжигании – вот что такое BCAA.

Формы выпуска

При выборе добавок обращать внимание нужно, прежде всего, на надежность бренда и дозировку. Не стоит обманываться, что, взяв дешевый продукт с более низким содержанием действующего вещества, удастся сэкономить. Хорошо, если дозировка начинается с 5 граммов BCAA в порции.

• Капсулы. Удобная форма и нейтральный вкус, достаточно быстрое растворение.
• Таблетки. Имеют слегка горьковатый привкус, требуется некоторое время на растворение и всасывание. Ещё выпускаются жевательные таблетки с разными вкусовыми добавками.
• Порошок. Может быть чистым или с фруктовым вкусом, очень быстро усваивается.
• Жидкость. Выпускаются в порционных флаконах или в виде концентрата, растворяемого в воде. Имеют высокую скорость всасывания, но наименее выгодны из всех форм выпуска.

Особенности приема BCAA

Интенсивный тренинг истощает запасы незаменимых аминокислот в организме, что приводит к разрушению мышечных волокон, снижению силовых показателей и даже упадку сил. Эти процессы подсказывают, когда принимать BCAA будет наиболее правильным.

Время и частота приема в дни тренировок

Итак, вне зависимости от того, направлена ли тренировка на жиросжигание или на рост мышечной ткани, комплекс BCAA стоит принять в самом ее начале. Это обеспечит спортсмену качественный тренинг, а мышцам – необходимую поддержку и питание. Для того чтобы не тормозить процесс восстановления и роста мышечных волокон, следующую порцию следует принять сразу по окончании тренировки.

Важно: если спортсмен выбирает растворимые, а не таблетированные BCAA, их следует принимать также во время тренировки. Такой подход обеспечит мышцам постоянное и более равномерное поступление аминокислот и жидкости.

Поскольку активнее всего процессы регенерации происходят во время сна, целесообразно употребить порцию аминокислот на ночь. Кстати, после высокоинтенсивных силовых тренировок это поможет минимизировать болевые ощущения в мышцах.

При наборе мышечной массы можно комбинировать БЦАА с другими видами спортивного питания: протеином, гейнером или креатином.

Польза BCAA будет заметна тем, кто стремится похудеть. Добавка способствует подавлению аппетита и активизации процесса жиросжигания за счет выработки лептина. С этой целью можно устроить дополнительные приемы аминокислот в течение дня. Однако если стоит вопрос экономии, их можно заменить протеиновым коктейлем.

Время и частота приема в дни отдыха

Чтобы избежать такого явления как утренний катаболизм и зарядить мышцы энергией, в день отдыха рекомендуется принять порцию аминокислот сразу после пробуждения. Еще один прием не помешает перед сном, в особенности, если на следующий день спортсмена ждет утренняя тренировка.

Дозировка

Средняя порция приема БЦА колеблется от 5 до 10 граммов. Частота приема – до 3-4 раз в сутки в дни тренировок и 1-2 раза в дни отдыха. Такая дозировка покрывает потребности спортсмена в BCAA при условии достаточного содержания незаменимых аминокислот в продуктах его рациона.

Возможные противопоказания

Как не может навредить организму мясо или творог, так же не сделает этого и дополнительный прием БЦА. Эти вещества совершенно безопасны, могут приниматься вне зависимости от возраста и уровня подготовки спортсмена, а также не требуют перерывов в приеме.

Аминокислоты совместимы с другими видами спортивного питания и даже способны увеличивать его эффективность. Единственное, чего не стоит делать – совмещать BCAA и алкоголь. Употребление напитков даже с низким содержанием алкоголя пагубно влияет на анаболизм, способствует наращиванию жировой массы и замедляет обменные процессы, что сводит к нулю все старания и делает прием аминокислот бессмысленным.

Содержание BCAA в продуктах питания

Рекордсменами по количеству БЦА являются куриная грудка, яйца, говядина, тунец, лосось, индейка – наиболее популярные продукты в рационе спортсменов. Так, например, порция куриной грудки весом 150 граммов содержит порядка 6 граммов BCAA.

Кроме того, можно найти незаменимые аминокислоты в растительной пище. Наиболее богаты ими бобовые (фасоль, нут, чечевица, горох), орехи (кешью, арахис) и многие семена (тыквы, льна, подсолнуха).

Отзывы о ВСАА

Любой спортпит нужно использовать правильно, в правильных дозах, в правильное время, в правильном режиме, для соответствующих целей — тогда все работает. Цель аминок — пресечь катаболизм в процессе и сразу после трени, и с утра, например, главную ценность bcaa имеют на сушке. Аминки не протеин — цели разные у продуктов. Во время трени прот пить не будешь, а аминки пожлуйста — все всосется и жкт практически не работает, ничего не мешает. Всему своя цель и правила; не используешь для целей, для которых преднозначено и нарушаешь правила — результата ноль.

QR-Rorschach, https://www.drive2.ru/communities/4062246863888189395/forum/288230376153517986

Вывод 1: на собственном опыте могу сказать, что BCAA принимать лучше именно перед нормальной тренировкой в зале или на свежем воздухе, чтобы увеличить количество подходов и время самой нагрузки. Бытовая активность лишь только создаст иллюзию.
Вывод 2: беспроигрышным вариантом будет прием комплекса после низкой (либо интенсивной, но тогда нужно и до, и после принимать аминокислоты) нагрузки. Атлетический эффект достигается быстрее, белок усваивается лучше и самочувствие получше.

bluejeanswhiteshirt, https://irecommend.ru/content/khotite-zheleznyi-press-i-popu-v-forme-funduka-nu-kupite-poprobuite-i-uspokoites-otzyv-o-bca

Усваиваются аминокислоты Optimum Nutrition BCAA отлично и никаких побочных эффектов от данной добавки возникнуть не может. Что касательно эффективности, то Optimum Nutrition не нуждается в хвалебных отзывах. При регулярном потреблении чувствуется ускорение восстановления. Особенно работа BCAA чувствуется при похудении и сушке.

no debts, https://otzovik.com/review_8052291.html

lock hopper — Russian translation – Linguee

If necessary, only travel with partly filled hopper. et.amazone.de	При необходимости производите движение только с заполненным наполовину бункером. et.amazone.de
The filling level sensor should not rest on the hopper! et. amazone.de	Датчик уровня не должен прилегать к бункеру! et.amazone.de
ZTE smartphones with old security […] can have two different lock types, so direct unlock […] might require two attempts. sigmakey.com	ZTE смартфоны со старым типом безопасности могут […] иметь два разных типа блокировки, поэтому для корректной […] разблокировки может потребоваться две попытки. sigmakey.com
Furthermore, in the view of the working group, […] it was premature to seek additional […] resources that would lock a staffing structure […] in place before the Chief Financial […] Officer, who had yet to be recruited, could express his or her views on the matter. daccess-ods.un.org	Кроме того, по мнению рабочей группы, преждевременно испрашивать дополнительные […] ресурсы, которые закрепили бы кадровую […] структуру, прежде чем главный сотрудник по […] финансовым вопросам, которого еще предстоит […] назначить, смог бы высказать свои мнения по данному вопросу. daccess-ods.un.org
And a hydraulic dump […] system allows to unload the hopper with 130 litres of dirt […] at a height of 1.42 m. nilfisk.ie	Гидравлическая разгрузка […] позволяет опустошать бункер объемом 130 литров на высоте […] 1,42 м. nilfisk.ru
The identified strategy is that of multiple guaranteed maximum price contracts, which allows the Administration to take advantage of beneficial market conditions to lock in low prices as quickly as possible without requiring the contractor to assume higher future risks and the related risk premium which would manifest itself in higher bids. daccess-ods.un.org	Применяется стратегия заключения нескольких контрактов с гарантированной максимальной стоимостью, которая позволяет администрации использовать в своих интересах благоприятную рыночную конъюнктуру для максимально оперативной фиксации низких цен, не требуя от подрядчика принимать на себя более высокие риски в будущем и применять соответствующую надбавку на риск, которая выразится в предложении более высоких цен. daccess-ods.un.org
A revolving hopper base with reduction outlet for spreading of slug pellets, oil seeds or similar fine granular material is built in as standard in the regulating system. bogballe.com	Изменяемое по величине отверстие для разбрасывания мелких гранул, семян масляных культур или подобного гранулированного материала устанавливается в стандартной комплектации. bogballe.com
Screed, augers, hydraulic hopper front, conveyors and [. ..] deflectors in front of the crawler tracks are set to transport position […] simply by pressing the Execute button. wirtgen.be	Лишь одним нажатием кнопки рабочий […] орган, распределительные шнеки, передняя […] заслонка на приемном бункере, ленточные конвейеры […] и отбойники перед гусеничными тележками […] переводятся в положение для изменения места работы. wirtgen.be
It is even […] possible to empty the hopper by engaging the drive […] wheel by hand when planter is in lifted position. tks-as.no	Возможно так же опорожнить бункер, приводя вручную ведущее […] колесо, когда сажалка находится в поднятом положении. tks-as.no
In addition, detainees at Abomey prison said that they had to pay extra to sleep outside or to stay outside until the final lock up or to be allocated to a particular building. daccess-ods.un.org	Кроме того, лица, содержавшиеся в тюрьме Абомея, рассказали, что они должны платить отдельно за право спать вне помещений, или оставаться снаружи до отбоя, или быть размещенными в том или ином корпусе. daccess-ods.un.org
If it is intended to prevent the lifting […] or lowering of the star wheel when the […] control valve 1 is actuated, lock the star wheel actuation […] in the menu operation. et.amazone.de	Если при перерыве в работе необходимо предотвратить, чтобы колесо с […] почвозацепами при приведении в действие […] устройства управления 1 поднималось или опускалось, блокируйте […] в рабочем меню управление колесом […] с почвозацепами. et.amazone.de
During operation: Do not open the cover of the tank and do not look directly into the hopper and spreader plate! technik-plus. eu	Во время работы машины: не открывайте крышку сеялки, не подходите близко к высевным тарелкам! technik-plus.eu
Where the precision of the dredging is not of highest importance a Trailing Hopper Suction Dredger was selected because of its high dredging performance and lower turbidity to minimise the environmental impact. nord-stream.com	На участках, где точность дноуглубительных работ не имеет первостепенного значения, был выбран земснаряд с грунтоприемником по причине его высокой производительности и более низкой мутности при работе, чтобы свести к минимуму воздействие на окружающую среду. nord-stream.com
Check tightness of all bolts and […] nuts, especially the wheel bolts, main frame […] bolts, bolts in hopper and any other main [. ..] structure connections highly stressed, […] after first day of work and at regular intervals thereafter. tks-as.no	Проверьте затяжку всех […] болтов и гаек, особенно колесные болты, […] болты основной рамы, болты бункера и все другие […] основные соединения сажалки, которые […] сильно нагружены, после первого дня работы и через регулярные промежутки времени впоследствии. tks-as.no
The powder overflow containers are outside the chamber and feature isolation […] valves so that unused materials can be sieved and reintroduced […] to the process via the hopper while the system is running. renishaw.com	Расширительные бачки для порошка находятся снаружи камеры и оснащены запорными клапанами, что позволяет […] выполнять просеивание и возврат [. ..] неиспользованных материалов в обработку через порошковый бачок-питатель […] во время работы системы. renishaw.ru
In December 2003, the chamber 41 was recorded in the Guinness Book of Records as […] the first underground ballooning of the balloon type «hopper«. ua-traveling.com	В декабре 2003 г. в камере 41-бис был […] зафиксирован рекорд, занесенный в книгу рекордов Гиннеса как […] первое подземное воздухоплавание на воздушном шаре типа «хоппер». ua-traveling.com
Ingestion pesticides have lower speed of […] action; they are effective for controlling locust species with prolonged hatching and for […] treating moving hopper bands. fao.org	Препараты кишечного […] типа действуют более медленно, и они эффективны при растянутом отрождении […] или при борьбе с движущимися […] кулигами личинок. fao.org
With the extra wide hopper opening, truck feeding of […] material is easy, rapid and trouble-free. bsa.bomag.com	Благодаря большой ширине бункера (в открытом состоянии) […] осуществляется простая, быстрая и беспроблемная загрузка асфальта грузовиком. bsa.bomag.com
Distribution and concentration of suspended sediments […] associated with disposal of dredged material from a large hopper. sakhalin-2.ru	Распределение и концентрация взвешенных отложений, [. ..] сопутствующие сбросу грунта с использованием большого бункера. sakhalin-2.ru
The operating keys controlling the flow of paving material have a […] “touch and feel” feature so that the operator does not have to take […] his eyes off the hopper and auger channel […] while paving. freza-doroga.ru	Кнопки управления подачей материала к плите […] имеют рельефную поверхность, поэтому ими можно пользоваться «вслепую», […] не отрывая взгляда от бункера или шнековой […] камеры. freza-doroga.ru
Dosys Pump technology Production safety […] Cleanable in Place hopper including level […] probe In West africa, a palm oil manufacturer [. ..] picked the PCM additive station to dose vitamin a into the bottles of oil. pcm-pump.com	Для бункера выполняется безразборная мойка, […] имеется датчик уровня В западной африке, один производитель пальмового масла […] выбрал станцию введения добавок PCM для дозирования витамина A в бутылках масла. pcm-pump.ru
In all other cases where the precision of the dredging is not of highest importance (i.e. top soil, re-dredging on dumping site) a Trailing Hopper Suction Dredger was selected because of its high dredging performance and lower turbidity to minimise the environmental impact. nord-stream.com	На участках, где точность дноуглубительных работ не имеет первостепенного значения (верхний слой грунта, повторное рытье в месте отвала грунта) был выбран земснаряд с фрезерным рыхлителем и грунтоприемником по причине его высокой производительности и более низкой мутности от его работы, чтобы свести к минимуму воздействие на окружающую среду. nord-stream.com
The functional unit of a FS flat bag dust collector comprises of the hood for dust-laden gas, the filter casing, the dust collection hopper with support structure and discharge unit. nederman.com	Практичная система удаления пыли с плоским рукавным фильтром FS состоит из вытяжного колпака для загрязненного пылью воздуха, корпуса фильтра, воронки для сбора пыли, опорной рамы и блока выгрузки. nederman.ru
This individual beat the author, locked him up, and finally abducted […] him to the Netherlands, where he arrived in August 2003. daccess-ods.un.org	Этот человек […] избил автора, держал его взаперти и в конечном итоге вывез […] его обманом в Нидерланды, куда тот приехал в августе 2003 года. daccess-ods.un.org
With regard to safety of individuals and buildings, funds were already raised in 2003, with the assistance of the Headquarters Committee (extrabudgetary resources), to finance the execution of priority work such as making the buildings more secure […] by means of redeveloping […] entrances, fitting high-security locks on the office doors of […] all the Permanent Delegations, refurbishment […] of all the sanitary facilities in Building V, and so on. unesdoc.unesco.org	Что касается безопасности сотрудников и имущества, то в 2003 г. в координации с Комитетом по Штаб-квартире (внебюджетные средства) были уже мобилизованы средства для финансирования осуществления таких приоритетных работ, как обеспечение безопасности зданий путем […] переоборудования вестибюлей, установки на […] дверях служебных помещений всех постоянных представительств [. ..] новых замков повышенной надежности, […] обновление всех туалетов в здании V и т.д. unesdoc.unesco.org
With respect to least developed countries (LDCs), the focal point for LDCs in BSP continued close […] collaboration with […] the High Representative of the United Nations Secretary-General for LDCs, Land—Locked Developing Countries (LLDCs) and Small Island Developing States (SIDS) in implementing […] the Brussels Programme of Action for LDCs. unesdoc.unesco.org	Что касается наименее развитых стран (НРС), то координаторы по НРС в BSP продолжали поддерживать тесное […] сотрудничество с Канцелярией […] Высокого представителя Генерального секретаря ООН по наименее развитым странам, развивающимся странам, не имеющим выхода к морю, и малым островным развивающимся государствам [. ..] в осуществлении […] Брюссельской программы действий для НРС. unesdoc.unesco.org
This policy of locking civilians into a combat zone during sustained […] military attacks, denying them the right to seek refuge, […] is not explicitly prohibited in any existing human rights treaty or covenant, but seems clearly inconsistent with the prohibition of customary international law on cruel and inhumane tactics, and appears to be at odds with the fundamental duty of Israel, under the Fourth Geneva Convention, to provide protection to an occupied population. daccess-ods.un.org	Эта политика блокирования гражданского населения в зоне боевых […] действий во время непрерывных военных нападений, лишающая […] их права на поиск убежища, не является конкретно запрещенной каким-либо существующим договором или конвенцией по правам человека, но представляется явно несовместимой с запретом обычного международного права жестокой и бесчеловечной тактики и противоречащей основной обязанности Израиля в соответствии с четвертой Женевской конвенцией обеспечить защиту оккупированного населения. daccess-ods.un.org

Бычий альбумин | 9048-46-8

Бычий альбумин Свойства

RTECS

MT6446000

темп хранения.

2-8 ° С

растворимость

PBS:> 40 мг / мл

форма

лиофилизированный порошок

цвет

прозрачный бесцветный

PH

6.5-7,5 (1% в 0,15 М хлориде натрия)

Растворимость в воде

Растворим в воде.

Мерк

13,8542

Стабильность:

Конюшня. Несовместим с сильными окислителями и сильными кислотами. Охладите.

Добавки косвенного действия, используемые в веществах, контактирующих с пищевыми продуктами

АЛЬБУМИН СЫВОРОТКИ

Оценки продуктов питания EWG

2

Словарь терминов NCI по раку

сывороточный альбумин

Система регистрации веществ EPA

Альбумины, сыворотка крови (9048-46-8)

БЕЗОПАСНОСТЬ

• Заявление о рисках и безопасности

Производитель	Номер товара	Описание продукта	Номер CAS	Упаковка	Цена	Обновлено	Купить
Сигма-Олдрич	A7517	Альбумин бычьей сыворотки Для использования в качестве маркера в SDS-PAGE		1 флакон	35 долларов. 6	2021-03-22	Купить
Сигма-Олдрич	A8531	pH альбумина бычьей сыворотки		1 флакон	45,3 долл. США	2021-03-22	Купить
Сигма-Олдрич	A8654	Молекулярный вес димера альбумина бычьей сыворотки ~ 132 мкДа		1 флакон	47 долларов.5	2021-03-22	Купить
Сигма-Олдрич	B8894	Альбумин, ацетилированный из бычьей сыворотки, не содержащий протеаз, для молекулярной биологии		0,5 мл	65 долларов.8	2021-03-22	Купить
Сигма-Олдрич	05470	Лиофилизированный порошок бычьего сывороточного альбумина, кристаллизованный, ≥98,0% (GE)	9048-46-8	1г	$ 88	2021-03-22	Купить

Бычий альбумин Химические свойства, применение, производство

Химические свойства

Кристаллический порошок

использует

Подходит для добавления в среду для культивирования клеток.

Методы очистки

Альбумин очищают путем растворения его в проводящей воде и пропускания при 2-4 ° через две ионообменные колонки, каждая из которых содержит смесь анионных и катионных смол в соотношении 2: 1 (Amberlite IR-120, H-form, Amberlite IRA-400, OH -форма). Эта процедура удаляет ионы и липидные примеси. Принимаются меры, чтобы исключить CO2, и раствор хранится при -15 °. [M.ller et al. Trans Faraday Soc 57 312 1961.] Более полное удаление липидов достигается лиофилизацией деионизированного раствора, покрывая высушенный альбумин (человеческая сыворотка) смесью 5% ледяной уксусной кислоты (об. / Об.) В изооктане (ранее сушили Na2SO4) и выдерживали при 0 ° (без перемешивания) более 6 часов перед декантированием и выбросом экстракционной смеси, промыванием изооктаном, повторной экстракцией и, наконец, двукратной промывкой изооктаном.Очищенный альбумин сушат под вакуумом в течение нескольких часов, затем диализуют против воды в течение 12-24 часов при комнатной температуре, лиофилизируют и хранят при -10 ° C [Goodman Science 125 1296 1957]. Он был перекристаллизован из растворов EtOH с высоким (35%) и низким (22%) содержанием из фракции V по Кону. Перекристаллизация с высоким содержанием EtOH происходит следующим образом: к 1 кг альбуминовой пасты фракции V при -5 ° добавляют 300 мл 0,4 M pH ( pH 5,5) ацетатный буфер в 35% EtOH, предварительно охлажденный до -10o, и 430 мл 0,1 M NaOAc в 25% EtOH также при -10o.Наилучшие результаты достигаются при добавлении всего буфера и примерно половины NaOAc и медленного перемешивания в течение 1 часа. Остальной NaOAc добавляют, когда все комки распались. Смесь оставляют при -5 ° на несколько дней для кристаллизации. Затем добавляют 35% EtOH (1 л), чтобы разбавить кристаллическую суспензию и снизить ионную силу перед центрифугированием при -5 ° (выход 80%). Кристаллы затем растворяют в 1,5 объемах 15% EtOH / 0,02 М NaCl при -5 ° С и осветляют фильтрованием через промытую прокаленную диатомитовую землю.Этот раствор можно перекристаллизовать, перенастроив его на условия первой кристаллизации, или он может быть перекристаллизован из 22% EtOH с помощью очень небольшого количества деканола (достаточного для получения конечной концентрации 0,02%). Обратите внимание, что кристаллизация из более низкой концентрации EtOH дала лучшую очистку (т.е. за счет удаления глобулинов и углеводов) и получения более стабильного продукта. Перекристаллизация с низким содержанием EtOH осуществляется следующим образом. К 1 кг фракции V при температуре от -10 ° до -15 ° добавляют 500 мл 15% EtOH при -5 ° С, медленно перемешивают до образования однородной суспензии.К 15% EtOH (500 мл) добавляют достаточно 0,2 М раствора NaHCO3 (125–150 мл) при 0 °, чтобы довести pH (разведение 1:10) до 5,3. Происходит некоторое повышение температуры, и необходимо соблюдать осторожность, чтобы поддерживать температуру. Продукты и сырье для приготовления бычьего альбумина.

Сырье

Препараты

Глобальные (303) Поставщики
Канада 1 Китай 242 Европа 3 Германия 9 Индия 4 Япония 2 Южная Корея 1 Швейцария 1 Великобритания 8 США 32 В мире 303

Посмотреть последнюю цену от производителей бычьего альбумина

9048-46-8 (бычий альбумин) Поиск по теме:

МЕТИЛИЗОЦИАНОАЦЕТАТ ДИХЛОРО (ЭТИЛЕНДИАМИН) ПЛАТИН (II) ТЕРТ-БУТИЛИЗОЦИАНИД Ацетилацетонат железа Бензил-изоцианид 1,1,3,3-ТЕТРАМЕТИЛБУТИЛ ИЗОЦИАНИД, КБАЛТ-БУТИЛИЗОЦИАНИД, КБАЛТ-БУТИЛЕНДИАЦИОНАЦЕТИЛАЦИОНАТ (II) ТРИЛАЦИНАЦИОНАТИОНАЦЕТИЛАЦИОНАТ (II) ТРАТ-БУТИЛ-БИНАЦИОНАЦЕТИЛАЦЕНТРАЦИОНАЦЕТИЛАЦЕНТРАЦИОНАЦЕТИЛАЦЕНТРАЦИОНАЦЕТИЛАЦЕНТА , 2,6,6-ТЕТРАМЕТИЛ-3,5-ГЕПТАНДИОНАТО) EUROPIUM (III) Ацетилацетонат алюминия Ацетилацетонат меди Бычий альбумин Бычий альбумин, Фракция КОНа V Альбумин сыворотки крови человека

• АЛЬБУМИН БЫЧИЙ СЫВОРОТКИ АЦЕТИЛИРОВАННЫЙ
• АЦЕТИЛИРОВАННЫЙ БСА
• BSA, МЕТИЛИРОВАННЫЙ
• BSA-C
• АЦЕТИЛИРОВАННЫЙ BSA-C
• МЕТИЛОВЫЙ ЭФИР БЫЧЬЕГО АЛЬБУМИНА
• АЦЕТИЛИРОВАННЫЙ BSA
• AC-BSA
• АЛЬБУМИН, СВИНЬЯ
• АЦЕТИЛИРОВАННЫЙ АЛЬБУМИН
• АЛЬБУМИН ТЯЧИЙ, АЦЕТИЛИРОВАННЫЙ
• АЛЬБУМИН, АЦЕТИЛИРОВАННАЯ БЫЧЬЯ СЫВОРОТКА
• АЛЬБУМИН ТЫСЯЧИЙ МЕТИЛИРОВАННЫЙ
• АЛЬБУМИН, БЫЧЬЯ СЫВОРОТКА МЕТИЛИРОВАННАЯ
• порошок альбумина
• Альбумины, сыворотка крови
• nhsa
• OmniPur BSA, фракция V, изоляция холодным спиртом — CAS 9048-46-8 — Calbiochem
• Альбумины сыворотки
• АМИНОКИСЛОТНЫЙ КОМПЛЕКС
• BSA НИЗКИЙ ЭНОДОТОКСИН
• АЛЬБУМИН, ТЫСЯЧИЙ (BSA), КРИСТАЛЛИЧЕСКИЙ
• Альбумин, ацетилированный из бычьей сыворотки
• АЛЬБУМИН, ТЯЧИЙ, ФРАКЦИЯ V ХОЛОДНЫЙ СПИРТ, ИЗОЛЯЦИЯ
• Сухой альбумин (яичный)
• сложная аминокислота
• Альбумин (ацетилированный телячья сыворотка)
• Альбумин сыворотки морской свинки
• Альбумин овечьей сыворотки
• альбумин из бычьей сыворотки, стандарт белка
• Альбумин собачьей сыворотки
• раствор альбумина бычьей сыворотки
• Альбумин осла
• альбумин из собачьей сыворотки
• АЛЬБУМИНБОВИН, ФРАКЦИОН, ЛИОФИЛИЗОВАННЫЙ ПОРОШОК
• АЛЬБУМИНБОВИН, СЫВОРОТКА, ФРАКЦИОН, ТЕПЛО-ШОКИЗОЛЯЦИЯ, БИОТЕХГРАДА
• АЛЬБУМИН ТЫСЯЧИЙ, ПО ОСНОВНОМУ БЕЗ ПРОТЕАЗ, АВСТРАЛИЙСКОЕ ПРОИСХОЖДЕНИЕ
• Альбумин из бычьей сыворотки, фракция V (pH 7.0)
• Альбумин фракция V (из крови крупного рогатого скота)
• Альбумин, низкий эндотоксин (из крови крупного рогатого скота)
• Альбумин кристаллический (из бычьей крови)
• Альбумин стандартный порошок (изоляция теплового шока, из бычьей крови)
• Бычий альбумин
• Бычий сывороточный альбумин
• Альбумин бычий, фракт V
• ALBUMIN BOVINE порошок фракции V pH 5.От 0 до 5,2
• ALBUMIN BOVINE порошок фракции V pH от 6,0 до 7,0
• ALBUMIN BOVINE, свободная от протеазы фракция V, порошок, pH от 6,0 до 7,0
• Альбумин из бычьей сыворотки, стандарт белка, стандарт белка
• Альбумин крысиный, RSA
• Бычий альбумин, BSA, фракция Кона V
• Альбумин из бычьей сыворотки, стандарт белка, раствор BSA, стандарт белка (бычий сывороточный альбумин)
• Альбумин макаки-резуса
• Альбумин бычий крист.
• Альбумин бычий фракт. V, очень низкий эндотоксин
• Альбумин Бычий V
• BSAV
• AlbuMin, Bovine SeruM, Low Endotoxin, ChroMatoPur, хроматографически очищенный из Новой Зеландии

Amazon.com: BSN SYNTHA-6 Whey Protein Powder, мицеллярный казеин, изолят молочного протеина, шоколадный молочный коктейль, 28 порций (упаковка может варьироваться): Здоровье и личная гигиена

Экстренная дезинфекция питьевой воды | Грунтовые и питьевые воды

В чрезвычайной ситуации, когда регулярное водоснабжение было прервано — например, ураган, наводнение или разрыв водопровода — местные власти могут рекомендовать использовать только воду в бутылках, кипяченую воду или дезинфицированную воду до восстановления нормального водоснабжения.В приведенных ниже инструкциях показано, как кипятить и дезинфицировать воду, чтобы убить большинство болезнетворных микроорганизмов, которые могут присутствовать в воде. Однако кипячение или дезинфекция не уничтожают другие загрязнители, такие как тяжелые металлы, соли и большинство других химикатов.

Распечатать документ «Экстренная дезинфекция питьевой воды».

№

ИСПОЛЬЗУЙТЕ ТОЛЬКО ВОДУ, ПРОИЗВЕДЕННУЮ НАДЛЕЖАЩИМ ОБРАЗОМ, ДЛЯ ПИТАНИЯ, ПРИГОТОВЛЕНИЯ, ПРИГОТОВЛЕНИЯ ЛЮБЫХ ПРИГОТОВЛЕННЫХ НАПИТКОВ, СМЫВАНИЯ ПОСУДЫ И ДЛЯ ЧИСТКИ ЗУБОВ.

• Используйте воду в бутылках или воду, которую вы правильно приготовили и хранили в качестве аварийного водоснабжения.
• Кипятите воду , если у вас нет воды в бутылках. Кипячения достаточно, чтобы убить патогенные бактерии, вирусы и простейшие (ВОЗ, 2015).
  • Если вода мутная, дайте ей отстояться и профильтруйте ее через чистую ткань, бумажное полотенце или кофейный фильтр.
  • Доведите воду до кипения не менее одной минуты.На высоте более 5000 футов (1000 метров) кипятите воду в течение трех минут.
  • Дайте воде остыть естественным образом и храните ее в чистых емкостях с крышками.
  • Для улучшения вкуса кипяченой воды добавьте щепотку соли в каждую кварту или литр воды или перелейте воду из одной чистой емкости в другую несколько раз.
• Продезинфицируйте воду с помощью бытового отбеливателя , если воду нельзя кипятить. Используйте только обычные отбеливатели без запаха, которые подходят для дезинфекции и санитарной обработки, как указано на этикетке.На этикетке может быть указано, что активный ингредиент содержит 6 или 8,25% гипохлорита натрия. Не используйте ароматизированные, безопасные для цвета или отбеливатели с добавлением чистящих средств. Если вода мутная, дайте ей отстояться и профильтруйте ее через чистую ткань, бумажное полотенце или кофейный фильтр.
  • Найдите чистую пипетку из аптечки или комплекта для оказания неотложной помощи.
  • Найдите свежий жидкий хлорный отбеливатель или жидкий хлорный отбеливатель, который хранится при комнатной температуре менее одного года.
  • Используйте приведенную ниже таблицу в качестве руководства, чтобы определить количество отбеливателя, которое вы должны добавить в воду, например, 8 капель 6% отбеливателя или 6 капель 8.25% отбеливателя на каждый галлон воды. Удвойте количество отбеливателя, если вода мутная, цветная или очень холодная.
  • Перемешайте и дайте постоять 30 минут. Вода должна иметь легкий запах хлора. Если этого не произошло, повторите дозировку и дайте постоять еще 15 минут перед использованием.
  • Если привкус хлора слишком сильный, перелейте воду из одной чистой емкости в другую и дайте ей постоять несколько часов перед использованием.

* Отбеливатель может содержать 6 или 8 штук.25% гипохлорит натрия.

Дополнительный водный указатель

• Подготовьте и храните аварийный водопровод. Посетите веб-сайт Федерального агентства по чрезвычайным ситуациям (FEMA), чтобы получить дополнительные инструкции по подготовке и хранению аварийного водоснабжения.
• Поищите другие источники воды в доме и вокруг него. Хотя вода в бутылках — ваш лучший выбор, вы можете найти другие источники воды, растопив кубики льда или осушив резервуар с горячей водой или трубы.Также можно использовать речную или озерную воду. Как правило, лучше использовать проточную воду, чем стоячую неподвижную воду. Однако не используйте воду с плавающим материалом или воду темного цвета или сомнительного запаха. Независимо от источника обработайте воду, следуя инструкциям на главной странице выше. Если на вашем участке есть колодец, который был затоплен, обязательно продезинфицируйте и проверьте воду из колодца после наводнения. Обратитесь в департамент здравоохранения своего штата или в местный отдел здравоохранения за советом или просмотрите наш документ «Что делать с личным колодцем после наводнения».
• Подумайте, как выглядит вода и как ее отфильтровать при необходимости. Дезинфекция не работает, если вода мутная или окрашенная. Если вода мутная, дайте ей отстояться. Затем процедите воду через чистую ткань, бумажное полотенце или кофейный фильтр. Отстоявшуюся и фильтрованную воду храните в чистых емкостях с крышками.

Другие методы дезинфекции

Если у вас нет жидкого отбеливателя, вы можете использовать один из других методов дезинфекции, описанных ниже.

• Гранулированный гипохлорит кальция. Сначала приготовьте раствор хлора, который вы будете использовать для дезинфекции воды. Для вашей безопасности делайте это в проветриваемом помещении и надевайте защитные очки. Добавьте одну чайную ложку с горкой (приблизительно унции) гранулированного гипохлорита кальция (HTH), прошедшего высокие испытания, в два галлона воды и перемешивайте, пока частицы не растворятся. В результате получится раствор хлора с концентрацией примерно 500 миллиграммов на литр. Для дезинфекции воды добавляйте одну часть раствора хлора на каждые 100 частей обрабатываемой воды.Это примерно то же самое, что добавить 1 пинту (16 унций) раствора хлора в 12,5 галлонов воды. Если вкус хлора слишком сильный, перелейте воду из одной чистой емкости в другую и дайте ей постоять несколько часов перед использованием. ВНИМАНИЕ: HTH — очень мощный окислитель. Следуйте инструкциям на этикетке для безопасного обращения и хранения этого химического вещества.
• Йод обыкновенный бытовой (или «настойка йода»). Возможно, в вашей аптечке или аптечке есть йод.Добавьте пять капель 2% -ной настойки йода на каждую литр воды, которую вы дезинфицируете. Если вода мутная или окрашенная, добавьте 10 капель йода. Перемешайте и дайте воде постоять не менее 30 минут перед использованием.
• Таблетки для дезинфекции воды. Для дезинфекции воды можно использовать таблетки, содержащие хлор, йод, диоксид хлора или другие дезинфицирующие средства. Эти таблетки можно приобрести в Интернете, в аптеках и магазинах спортивных товаров. Следуйте инструкциям на этикетке продукта, так как каждый продукт может иметь разную концентрацию.

Дополнительная информация

Исследование прикрепления бычьего сывороточного альбумина (BSA) к самоорганизующимся монослоям (SAM) с использованием комбинаторных кварцевых микровесов с диссипацией (QCM-D) и спектроскопической эллипсометрии (SE)

Abstract

Понимание кинетики адсорбции белка на поверхности важно для различных экологических и биомедицинских приложений. Адсорбция бычьего сывороточного альбумина на различных самоорганизующихся монослойных поверхностях, включая нейтральные и заряженные гидрофильные и гидрофобные поверхности, была исследована с помощью комбинаторных кварцевых микровесов in-situ с диссипацией и спектроскопической эллипсометрией.Адсорбция бычьего сывороточного альбумина варьировалась в зависимости от свойств поверхности, концентрации бычьего сывороточного альбумина и значения pH. Заряженные поверхности демонстрируют большее количество адсорбции бычьего сывороточного альбумина, большую толщину слоя бычьего сывороточного альбумина и повышенную плотность белка бычьего сывороточного альбумина по сравнению с нейтральными поверхностями при нейтральном значении pH. Количество адсорбированного белка бычьего сывороточного альбумина увеличивалось с увеличением концентрации бычьего сывороточного альбумина. После достижения равновесия сорбция достигается при pH 7.0, десорбция бычьего сывороточного альбумина произошла при снижении pH до 2,0, что ниже изоэлектрической точки бычьего сывороточного альбумина. Наши данные являются дополнительным доказательством того, что комбинаторные микровесы из кристаллов кварца с диссипацией и спектроскопической эллипсометрией являются чувствительным аналитическим инструментом для оценки присоединения и отсоединения адсорбированных белков в системах, влияющих на окружающую среду.

Образец цитирования: Phan HTM, Bartelt-Hunt S, Rodenhausen KB, Schubert M, Bartz JC (2015) Исследование прикрепления бычьего сывороточного альбумина (BSA) к самоорганизующимся монослоям (SAM) с использованием комбинаторных микровесов с кварцевыми кристаллами с диссипацией (QCM) -D) и спектроскопической эллипсометрии (SE).PLoS ONE 10 (10):
e0141282.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0141282

Редактор: Дариуш Хиндербергер, Университет Мартина Лютера Галле-Виттенберг, ГЕРМАНИЯ

Поступила: 12 мая 2015 г .; Одобрена: 5 октября 2015 г .; Опубликовано: 27 октября 2015 г.

Авторские права: © 2015 Phan et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в пределах документ и вспомогательные информационные файлы к нему.

Финансирование: Финансирование этой работы было предоставлено Национальным научным фондом (www.nsf.gov) (награда CBET-1149242 для SB и награда EPS-1004094 для MS). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что конкурирующих интересов не существует.

Введение

Адсорбция белка на поверхностях играет важную роль во многих областях, включая медицину, биологию, фармацевтические разработки и экологическую инженерию [1] с приложениями во взаимодействиях белок-ДНК; составление и хранение лекарств; и дезактивация окружающей среды.Процессы прикрепления белков были исследованы на различных естественных и искусственных поверхностях [2–11]. Как правило, адсорбция белка на границе твердое тело / жидкость может происходить из-за электростатических взаимодействий, гидрофобных взаимодействий и взаимодействий, связывающих водород. На этот процесс влияют свойства белка (такие как стабильность), поверхность адсорбента и раствора, такие как ионная сила и значение pH [12]. Как только белок ассоциируется с поверхностью, такие процессы, как переориентация белка, могут вызывать конформационные изменения, сопровождающиеся разворачиванием белка, латеральными белок-белковыми взаимодействиями и десорбцией [2].Структурные изменения адсорбированного белка могут изменить биологическую функцию белка [13], но наблюдение структурных изменений адсорбированного белка является сложной задачей. Мы предлагаем использовать кварцевые микровесы с диссипацией (QCM-D) в сочетании со спектроскопической эллипсометрией (SE) для измерения дополнительной информации in-situ , которая позволяет одновременно определять адсорбционную толщину, адсорбционную массу и пористость. QCM-D / SE — это метод с широким потенциалом применения для характеристики биологических явлений в наномасштабе.Этот метод может обеспечить понимание белковых взаимодействий на границах раздела твердое / жидкое вещество, включая структурное расположение, кооперативную адсорбцию, перекрестное сшивание, кинетику адсорбции и агрегацию белков [14-17].

Бычий сывороточный альбумин (БСА) подходит для исследований прикрепления из-за его высокой стабильности, доступности при высокой чистоте и растворимости в воде [4, 18]. PH раствора влияет на адсорбцию BSA, поскольку изоэлектрическая точка (IEP) BSA находится при pH 4,5–5,0, поэтому белок отрицательно заряжен при нейтральном pH [3, 4, 7, 18–20] и положительно заряжен в кислых условиях.Три домена БСА с различной поверхностной плотностью заряда влияют на адсорбцию БСА на заряженных поверхностях [21, 22]. Например, наличие как отрицательно заряженных аминокислот (глутаминовая кислота, аспарагиновая кислота), так и положительно заряженных остатков (лизин, гистидин) на БСА может привести к прикреплению как к положительно, так и к отрицательно заряженным поверхностям [3, 18]. При значениях pH выше ИЭП белка наблюдалась адсорбция на отрицательно заряженных поверхностях за счет электростатических взаимодействий с положительно заряженными аминокислотными остатками [3, 7].Кроме того, адсорбция БСА является pH-зависимым явлением, в результате чего максимальная адсорбция белка наблюдается около IEP, а уменьшение адсорбции наблюдается при pH выше или ниже IEP [4, 6, 7].

BSA адсорбируется на различных поверхностях, таких как титановый порошок [19], TiO ₂ [4], глины [3], полимеры [7] и оксидные минералы [6], по данным спектрофотометрических измерений [4], колориметрических измерений. оценка [7], а также различные спектроскопические методы, включая ЯМР, флуоресценцию, круговой дихроизм и FTIR-спектроскопию [3].Существует ограниченное количество исследований адсорбции БСА на биофункциональных и экологически значимых поверхностях, таких как самоорганизующиеся монослои (SAM). Недавнее исследование, посвященное анализу прикрепления белка наночастиц ДНК и фетальной бычьей сыворотки (FBS) к модельным субстратам биоматериала, было одним из первых, в котором была проведена оценка адсорбции белка с использованием QCM-D / SE [15, 23].

Целью данного исследования было использование комбинаторного in-situ QCM-D / SE для исследования процессов динамической адсорбции BSA на различных экологически значимых поверхностях SAM.Выбранные поверхности SAM, несущие отдельные конечные функциональные группы, представляют собой доминирующие функциональные группы в почвенных минералах и почвенном органическом веществе и используются в этом исследовании для представления экологически значимых поверхностей. Мы определили характеристики физической адсорбции BSA в зависимости от свойств SAM, pH раствора и концентрации BSA. Мы предполагаем, что прикрепление БСА сильно зависит от поверхностных свойств монослоя SAM, включая поверхностный заряд и гидрофобность.Предыдущие исследования адсорбции БСА были в основном сосредоточены на кинетических измерениях и конформационных изменениях БСА после поверхностной адсорбции. Комбинаторный метод in-situ QCM-D / SE обеспечивает дополнительный параметр, объемную долю адсорбата или пористость, которые являются ценным параметром при определении биологических свойств органической массы. На сегодняшний день в ограниченных исследованиях измеряется адсорбция BSA на различных поверхностях SAM, и в предыдущих исследованиях не сообщалось об объемной доле (пористости) адсорбированного BSA по отношению к SAM, которая может предоставить информацию о конформации BSA, адсорбированной на поверхности.

Материалы и методы

Препарат ЗРК

SAM, исследованных в этом исследовании, включают 11-меркапто-1-ундеканол (MUOH, 99%, Fisher Scientific), 11-меркаптоундекановую кислоту (MUA, 98%, Fisher Scientific), 1-декантиол (DT10, 99%, Fisher Scientific). и гидрохлорид 11-амино-1-ундекантиола (AUT,> 90%, Dojindo). MUOH, MUA и AUT имеют гидрофильные гидроксильные (–OH), карбоксильные (–COOH) и аминные (–NH ₂ ) концевые функциональные группы, соответственно, в то время как DT10 имеет гидрофобные метиловые (–CH ₃ ) концевые функциональные группы. группа (таблица 1).В условиях нейтрального pH, используемых в этом исследовании (pH 6,7), MUOH и DT10 являются нейтральными, в то время как AUT заряжен положительно, а MUA отрицательно заряжен. Эти SAM хорошо охарактеризованы и широко используются в качестве модельных поверхностей [24, 25]. н-Алкантиолы присоединяются к поверхности Au посредством хемосорбции на тиоловой группе с образованием плотноупакованных SAM, оставляя другой конец функциональных групп (–CH _3, –OH, –COOH и –NH ₂ ) доступными для связывания белки [26]. Подложка из Au была выбрана потому, что она биосовместима и может быть легко модифицирована с помощью прикрепления SAM за счет образования стабильных связей металл-сера [18, 27, 28].

Для подготовки поверхности SAM было приготовлено 2 мМ каждого раствора алкантиола с использованием фильтрованного и дегазированного этанола пробы 200 (Fisher Scientific). В качестве подложек использовались сенсоры на кристалле кварца, покрытые слоем Au толщиной 100 нм. Датчики были произведены Biolin Scientific и использовались в исходном виде.

Датчики с золотым покрытием сначала промывали обильным количеством ацетона (Fisher Scientific), а затем этанолом пробы 200, перед формированием SAM путем погружения пластины в 20 мл 2.0 мМ раствор алкантиола в желтой бутылке, покрытой потоком газа Ar, в течение не менее 45 минут (MUOH и MUA), 60 минут (AUT) и 18 часов (DT10) при комнатной температуре. Подготовленные сенсоры Au с покрытием SAM затем промывали этанолом крепостью 200 мм, чтобы гарантировать удаление физически абсорбированных молекул тиола. Поверхности SAM сушили в атмосфере газа N ₂ .

Измерение угла смачивания

Краевой угол смачивания количественно описывает смачиваемость поверхности [2]. Были измерены статические углы смачивания чистых поверхностей Au до осаждения SAM и поверхностей Au после осаждения SAM.Чтобы изучить разницу в угле смачивания из-за наличия SAM, мы использовали микрошприц, чтобы поместить неподвижную каплю воды на поверхность Au. Углы смачивания определяли количественно с использованием системы Ramé-Hart Imaging (Ramé-Hart, Inc.) и программного обеспечения ImageJ.

Ex-situ эллипсометрия

Эллипсометрические измерения Ex-situ были выполнены с использованием спектроскопического эллипсометра M-2000-VI (J.A.Woollam Co., Inc.) для оценки толщины слоя SAM, нанесенного на поверхность Au. Ex-situ эллипсометрические измерения на поверхностях Au были выполнены при комнатной температуре как до, так и после хемосорбции SAM в спектральном диапазоне 370–1640 нм и под разными углами падения относительно нормали к подложке от 45 ^° до 75 ^° с шагом 10 ^° . Использовалась двухслойная оптическая модель подложка-ЗРК. SAM моделировался слоем Коши, где коэффициент экстинкции k обязательно равен 0 и где мы приняли показатель преломления n равным 1.5. Оптические константы поверхности Au были определены из измерений, проведенных до хемосорбции SAM, в то время как слой Коши имел толщину 0. Затем толщину слоя Коши позволяли варьировать с помощью оптической модели в соответствии с данными расчетов модели и экспериментальными данными. данные, полученные после хемосорбции SAM, наилучшим образом соответствовали программному пакету WVASE ³² (JAWoollam Co., Inc.).

Белок BSA

Исходный раствор BSA получали растворением порошка BSA (Fisher Scientific) в DI H ₂ O до конечной концентрации 1.0 мг / мл. БСА представляет собой глобулярный белок, приблизительно имеющий форму вытянутого сфероида размером 4 нм x 4 нм x 14 нм в водном растворе [29]. Для исследования адсорбции как функции концентрации BSA был проведен ряд экспериментов с использованием AUT SAM с концентрациями раствора BSA 1000 мкг / мл, 1,0 мкг / мл, 0,5 мкг / мл и 0,1 мкг / мл.

In-situ комбинаторный QCM-D / SE

Адсорбцию

BSA на поверхностях, покрытых SAM, контролировали в режиме реального времени с помощью комбинаторного QCM-D / SE in-situ.Подробности о сборе данных и сравнении между QCM-D и SE описаны в предыдущем исследовании, проведенном двумя авторами [30]. Вкратце, для слоя пористого органического адсорбата QCM-D чувствителен к присутствию как присоединенного адсорбата, так и окружающей жидкости, которая связана с адсорбатом. С другой стороны, для пористых прозрачных слоев адсорбата с толщиной, которая очень мала по сравнению с длиной волны зондирующего света (т.е. порядка 10 нм или меньше), SE не чувствителен к окружающей жидкости в слое адсорбата.Таким образом, объемная пористость адсорбата (f _{o, V} ) может быть найдена, если известны параметр толщины адсорбата d _SE , определенный SE, и параметр толщины адсорбата d _QCMD , определенный QCM-D. Для особого случая, когда плотности адсорбата и жидкости считаются эквивалентными (для простоты), f _{o, V} — это отношение d _SE к d _QCMD [30, 31].

Комбинаторный прибор QCM-D / SE состоит из M-2000-V SE (J.A. Woollam Co., Inc.), который измеряет 512 длин волн в видимом и ближнем инфракрасном спектрах одновременно (370–1000 нм), с установленным E1 QCM-D (Biolin Scientific). Оптическая модель для измерений in-situ представляла собой трехслойный слой подложка-SAM-BSA в среде раствора DI H ₂ O. Точно так же белковый слой моделировался слоем Коши, предполагая, что n = 1,5. Если в этом предположении есть ошибка, эта ошибка будет распространяться на значение толщины SE. Для органических материалов, которые в экспериментальных условиях представляют собой порошки, включая алкантиолы с концевыми группами –NH ₂ , количественное определение показателя преломления проблематично.Кроме того, мы также предполагаем, что BSA представляет собой тонкий органический слой. Перед измерением in-situ QCM-D / SE было выполнено три измерения ex-situ SE для разработки оптической модели. Начальные значения были взяты из описанной выше двухслойной оптической модели. Сначала образец с покрытием SAM был измерен на воздухе при угле падения 65 ^° относительно нормали к подложке, чтобы подтвердить исходные значения оптической модели. Во-вторых, образец был помещен в жидкостную камеру с окнами, которая позволяет проводить измерения QCM-D и для зондирующего света входить и выходить под углом падения 65 ^° относительно нормали к подложке; Измерение SE проводилось при атмосферном воздухе.Зависящие от длины волны смещения эллипсометрического параметра Δ , которые учитывали эффекты двойного лучепреломления окна, варьировались оптической моделью для наилучшего согласования данных. В-третьих, DI H ₂ O закачивали в камеру для жидкости с помощью перистальтического насоса (Ismatec IPC-N 4, IDEX Health & Science GmbH), и измерение SE проводилось в жидкой среде. Оптические константы подложки были разрешены оптической моделью для наилучшего согласования данных, но различия оказались незначительными [32].Наконец, начиная с начальной точки, равной нулю, толщине слоя Коши для BSA было разрешено варьироваться для последующих измерений на месте .

Все растворы пропускали через жидкостную ячейку с помощью перистальтического насоса (Ismatec IPC-N 4) (Biolin Scientific), присоединенного к трубке Tygon (Fisher Scientific), и 3-х канального клапана 90 ^° (Hamilton) при потоке скорость 0,1 мл / мин. DI H ₂ O был закачан в камеру для жидкости, и обоим инструментам дали возможность уравновеситься в течение приблизительно 2 часов для получения базовых показаний [27].После стабилизации с помощью DI H ₂ O раствор BSA вводили в проточную ячейку на 30 минут, а затем поток останавливали, чтобы позволить молекулам BSA адсорбироваться на поверхности SAM в течение примерно 70 минут. Затем в жидкую ячейку закачивали DI H ₂ O для удаления любых пассивно связанных молекул BSA [27]. Изменения толщины, массы и пористости SE и QCM-D, вызванные прикреплением BSA, непрерывно отслеживались, и сбор данных выполнялся с помощью CompleteEASE (J.A. Woollam Co., Inc) и QSoft (Biolin Scientific) для SE и QCM-D соответственно. Чтобы гарантировать воспроизводимость измерений для каждой поверхности Au, покрытой SAM, были выполнены три измерения QCM-D / SE для каждого типа SAM. Данные QCM-D продемонстрировали (данные не показаны), что максимальный сдвиг рассеяния был мал по сравнению со сдвигом частоты во время измерений. Таким образом, органическая тонкая пленка считалась жесткой, и ее толщина QCM-D рассчитывалась с использованием уравнения Зауэрбрея с третьим частотным обертоном [30, 31].Данные, полученные с помощью QCM-D / SE, были статистически представлены путем объединения 30 конечных точек данных каждого повторного эксперимента, всего 90 точек данных для каждого SAM, из которых были определены адсорбированная толщина, объемная доля и соответствующие значения стандартной ошибки [27]. Скорость адсорбции БСА за определенный период времени рассчитывалась путем деления поверхностной массы адсорбированного БСА на время адсорбции [33].

Для исследования адсорбции BSA в зависимости от pH был проведен эксперимент, как описано выше, с дополнительной стадией полоскания.В этом эксперименте после стабилизации DI H ₂ O систему промывали буферным раствором с pH 2. В этом эксперименте использовали концентрацию BSA 1,0 мкг / мл и AUT SAM.

Результаты

Подтверждение формирования ЗРК

Чтобы проверить покрытие SAM поверхности Au, измерение ex-situ было выполнено до и после прикрепления SAM с использованием спектроскопического эллипсометра и гониометра угла смачивания (S1, рис.). Средняя толщина SAM и средние углы смачивания водой каждой поверхности Au, покрытой SAM, представлены в таблице 2.

Длину слоя SAM можно рассчитать, умножив его количество связей C-C на длину C-C 0,154 нм и принимая во внимание валентный угол C-C 109,5 ^° . Ожидаемая толщина SAM определялась умножением расчетной длины SAM на sin (60 ^° ) [31]. Углы смачивания MUOH, MUA и AUT были меньше 90 ^° , в то время как угол смачивания DT10 был больше 90 ^° , что указывает на образование SAM с гидрофильным концом и гидрофобным концом соответственно [34, 35].Адсорбция SAM на поверхности Au исследовалась в ряде предыдущих исследований с противоречивыми результатами [2, 36, 37]. В предыдущем исследовании статические краевые углы смачивания MUOH, MUA и DT10 составляли 10 °, 15 ^° и 97 ^° соответственно [2], а для MUA и DT10 — ≤ 10 ^° . и ~ 110 ^° соответственно в другом исследовании [36]. Расхождения в заявленных краевых углах смачивания MUOH, MUA и DT10 также наблюдались в предыдущем исследовании, что может указывать на то, что выход SAM был неполным, поскольку образование монослоя зависит от времени погружения, чистоты тиолов и качества поверхность Au [2].

Измеренная толщина SAM соответствовала расчетной толщине SAM для MUA и AUT SAM (Таблица 2). Толщина DT10, наблюдаемая в этом исследовании, согласуется с предыдущим исследованием Mendoza et . и . [36]. Комбинация краевого угла смачивания и данных измерений ex-situ демонстрирует наличие почти полного покрытия гидрофобных SAM (краевые углы> 90 ^° ) и гидрофильных SAM (контактный угол <90 ^° ) на используемых поверхностях Au в этом исследовании; Однако мы не можем исключить возможность образования прерывного монослоя для всех SAM, использованных в данном исследовании.

In-situ Толщина и пористость BSA, нанесенного тонкой пленкой на различные SAM

Представитель in-situ QCM-D / SE измерения адсорбции BSA представлены на рис. 1. d _SE представляет только вклад адсорбата, тогда как d _QCMD представляет как адсорбат, так и связанный с ним растворитель, захваченный слоем адсорбата [30 –32, 38, 39]. Комбинация этих двух параметров позволяет определить дополнительный параметр, объемную долю адсорбата (f _{o, V} = d _SE / d _QCMD ).Объемная доля количественно описывает пористость тонких пленок [30–32, 38, 39] с увеличением объемной доли, свидетельствующей об уменьшении пористости (т.е. меньшем включении окружающего растворителя) [27]. Сводка изменений абсорбированной толщины и объемной доли для измерений in-situ QCM-D / SE представлена ​​на рис. 2. Толщина, представленная на панели A, представляет собой разницу в адсорбированном BSA после промывки DI H ₂ O относительной до измеренной толщины до адсорбции BSA.

Рис 2.Средние значения из трех измерений SE / QCM-D.

(A) Параметры толщины SE и QCM-D (d _SE , d _QCMD , соответственно) различных поверхностей SAM с соответствующими стандартными ошибками. (B) Объемные доли адсорбата (f _{o, V} ) различных поверхностей SAM с соответствующими стандартными ошибками.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0141282.g002

Адсорбция BSA происходила на всех поверхностях SAM, и, как и ожидалось, толщина иммобилизованного BSA варьировалась для разных SAM (рис. 1).Наименьшее количество прикрепления БСА было измерено на нейтральной гидрофильной поверхности MUOH (рис. 1А), с d _SE = (0,450 ± 0,019) нм (95% ДИ [0,41, 0,49]). Присоединение BSA к нейтральной гидрофобной поверхности DT10 было больше с измеренным значением d _SE = (0,891 ± 0,009) нм (95% ДИ [0,87, 0,91]). Для заряженных поверхностей адсорбция BSA на MUA (рис. 1B), отрицательно заряженной гидрофильной поверхности, была сопоставима с адсорбцией на AUT (рис. 1C), положительно заряженной гидрофильной поверхности, как измерено с помощью SE.Для заряженных поверхностей адсорбция БСА была примерно в 4,5–5,2 и 2,3–2,6 раза выше по сравнению с адсорбцией на нейтральных поверхностях MUOH и DT10 соответственно.

Толщина адсорбированного слоя BSA, определенная с помощью QCM-D на нейтральной гидрофильной поверхности MUOH, составляла d _QCMD = (1,430 ± 0,048) нм. Адсорбция БСА на нейтральной гидрофобной поверхности DT10 была в 2,5 раза больше, чем на поверхности MUOH (рис. 1A и 1D). Адсорбция БСА на заряженных поверхностях составила 3.0 и 1,2 раза больше, чем прикрепление BSA к нейтральным поверхностям MUOH и DT10 соответственно (рис. 1). Адсорбция БСА на заряженных гидрофильных поверхностях AUT и MUA была сопоставимой (таблица S1). Результаты QCM-D / SE показывают, что адсорбция БСА увеличивается как MUOH

Данные об объемной доле присоединенных белков BSA указывают на то, что поверхностные свойства SAM влияют на упаковку поверхностно-ассоциированного белка BSA (рис. 2). Объемная доля белков БСА, прикрепленных к поверхностям MUOH и DT10, была аналогичной при f _{o, V} для MUOH = 0.303 ± 0,045 (95% ДИ [0,29, 0,31]) и f _{o, V} для DT10 = 0,251 ± 0,009 (95% ДИ [0,23, 0,27]), что указывает на то, что молекулы БСА, вероятно, имели сходное расположение на этих поверхностях или БСА. адсорбция на этих поверхностях имела аналогичную пористость. Объемная доля БСА (f _{o, V} = 0,552 ± 0,009 (95% ДИ [0,53, 0,57])) была самой высокой на положительно заряженной гидрофильной поверхности AUT, за которой следовала отрицательно заряженная гидрофильная поверхность MUA (f _{o , V} = 0,477 ± 0,002 (95% ДИ [0,45, 0,46])).

Площадь поверхности BSA и количество осажденных молекул BSA на различных SAM

На рис. 3 показана расчетная поверхностная масса BSA, прикрепленного к каждой из четырех различных поверхностей SAM.«Сухая масса» (m _SE , рис. 3A) и «влажная масса» (m _QCMD , рис. 3B) имеют аналогичные формы, а m _QCMD данного SAM всегда больше, поскольку измеренная масса включает жидкость. растворитель. Хотя периоды уравновешивания BSA были немного разными для каждого оцениваемого SAM, на предельную массу адсорбированного BSA не повлияли, поскольку максимальная адсорбция была достигнута до фаз промывки DI H ₂ O.

Рис. 3. Поверхностная масса BSA, прикрепленная к различным поверхностям Au, покрытым SAM, измеренная с помощью SE и QCM-D.

(A) м _SE : площадь поверхности, измеренная с помощью SE, и (B) м _QCMD : площадь, измеренная с помощью QCM-D. Время 0 было началом фазы BSA, следующей за начальной фазой DI H ₂ O. Различные оттенки соответствуют фазе полоскания каждого SAM. Фазы полоскания всех измерений не были одновременными.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0141282.g003

Используя «сухую массу» BSA, прикрепленную к поверхности, 2,77 x 10 ¹² –3,17 x 10 ¹² молекул BSA были нанесены на MUA и AUT и представлены 2.В 3–5,2 раза больше количества молекул БСА, нанесенных на DT10 и MUOH, соответственно (таблица S1). Подобно тенденциям, наблюдаемым для d _SE и d _QCMD , нанесенная влажная и сухая масса были самыми высокими на MUA и AUT и были ниже на DT10 и MUOH. Тенденция массового осаждения была MUOH

Взаимодействие BSA с AUT SAM в зависимости от концентрации раствора BSA

Снижение концентрации BSA с 1,0 мкг / мл до 0,1 мкг / мл обычно приводило к снижению адсорбции белка (рис. 4).Средняя площадь поверхности при трехкратных измерениях с использованием раствора BSA 1000 мкг / мл составила (0,46 ± 0,008) мкг / см ² (таблица S1), что аналогично удельной массе 0,47 мкг / см ² , измеренной для 1,0 мкг / мл раствора БСА. При концентрации раствора ниже 0,1 мкг / мл адсорбция не была обнаружена (данные не показаны), поэтому предел комбинаторного in-situ QCM-D / SE обнаружения для BSA происходит при водных концентрациях от 0,1 до 1,0 мкг. / мл BSA, что подчеркивает чувствительность этого прибора.

Рис. 4. Взаимодействие BSA с AUT SAM в зависимости от концентрации BSA.

(A) Площадь прикрепления BSA, обнаруженная QCM-D. (B) Объемная доля насадки BSA. Время 0 было началом фазы BSA, следующей за начальной фазой DI H ₂ O.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0141282.g004

Хотя адсорбированный белок был сопоставим при концентрациях 1000 мкг / мл и 1,0 мкг / мл, их соответствующие пористости не были одинаковыми (рис. 4B).При 1000 мкг / мл объемная доля БСА была приблизительно 0,55 ± 0,009 (таблица S1) и на 10-25% выше, чем объемные доли, определенные для концентрации раствора БСА 1,0 мкг / мл. Более высокая концентрация БСА приводила к более плотной упаковке молекул БСА.

Скорость адсорбции BSA как функция свойств поверхности и концентрации BSA

Кинетика адсорбции важна в таких приложениях, как адсорбция органических загрязнителей на чистых мембранах [40]. На рис. 5 представлены начальные скорости адсорбции BSA, определенные из линейного участка кинетических кривых, и общие скорости адсорбции BSA, определенные из измерений, когда система находилась в равновесии, как функция свойств поверхностей SAM.Адсорбцию БСА на поверхности можно наблюдать как двухфазный процесс, первая фаза которого представляет собой быстрое осаждение (представленное как начальная скорость адсорбции) БСА, за которым следует вторая фаза с более медленной адсорбцией (рис. 1) [31]. Поверхность SAM сильно влияла на скорость адсорбции БСА. Наблюдалось, что начальная скорость адсорбции была самой высокой на поверхности AUT ((39,0 ± 10,1) нг / мин · см ² (95% ДИ [-14,41, 92,43])), что в четыре раза превышало адсорбцию на MUOH. и поверхности MUA; и в десять раз больше, чем адсорбция на поверхности DT10 (рис. 5A).Тенденция общей скорости адсорбции отличалась от начальной скорости адсорбции как MUA> AUT> MUOH> DT10 (рис. 5B).

Влияние pH на адсорбцию BSA на AUT SAM

Поверхностная масса адсорбированного БСА уменьшилась примерно через 40 мин промывки раствором с pH 2 (рис. 6). После фазы ополаскивания при pH 2 вполне вероятно, что все адсорбированные молекулы BSA отделились от поверхности, что привело к почти нулевой объемной доле. Поверхностная масса приблизительно 50 нг / см. ² была определена с помощью QCM-D после фазы промывки раствора с pH 2 и представляла только количество растворителя.

Рис. 6. Влияние pH раствора на адсорбцию BSA на AUT SAM.

Раствор pH 2 промывали в ячейку с жидкостью непосредственно перед фазой промывки DI H ₂ O. Время 0 было началом фазы BSA, следующей за начальной фазой DI H ₂ O, которая не была показана.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0141282.g006

Обсуждение

В этом исследовании мы демонстрируем адсорбцию BSA на выбранных SAM алкантиола, которые представляют собой различные типы экологически значимых поверхностей и включают вариабельность поверхностного заряда и гидрофобности.

Взаимодействие BSA с поверхностями как функция свойств поверхности

Поскольку SAM, исследованные в этом исследовании, имели сходную длину углеродной цепи (Таблица 1), мы можем объяснить различия в адсорбции BSA различиями между функциональными хвостовыми группами SAM. Наибольшая адсорбированная толщина наблюдается на заряженных гидрофильных поверхностях MUA и AUT (т.е. карбоксильных и аминогрупп соответственно). Между тем нейтральные поверхности, такие как DT10 и MUOH, имели меньшую адсорбционную толщину BSA, в которых гидрофильная хвостовая группа (гидроксильная группа) привлекала меньше молекул BSA, чем гидрофобная (метильная группа).Площадь адсорбированной массы показала ту же тенденцию, что и адсорбированные толщины (таблица S1). Это открытие также наблюдалось в предыдущих исследованиях, в которых поглощенная масса уменьшалась по мере того, как поверхности становились более гидрофильными [1, 12, 14, 40–43]. Преобладающий механизм, приписываемый адсорбции БСА на DT10, — это гидрофобные взаимодействия между метильной группой и гидрофобными доменами БСА [42, 43]. Преобладающий механизм, вероятно, ответственный за адсорбцию БСА на MUOH с концевыми гидроксильными группами, — это взаимодействия водородных связей между концевым спиртом и белком [40, 42–44].

Для заряженных поверхностей, поскольку как отрицательно, так и положительно заряженные поверхности MUA и AUT демонстрируют адсорбцию БСА при нейтральном pH, электростатическое взаимодействие вряд ли будет преобладающим механизмом адсорбции [43]. При нейтральном pH белки BSA имеют отрицательный заряд и отталкиваются от отрицательно заряженной поверхности MUA, и ожидается снижение адсорбции BSA, однако наблюдалась адсорбция белков BSA на отрицательно заряженные поверхности в водном растворе при нейтральном pH (рис. 1B). ).Адсорбция белков БСА на отрицательно заряженную поверхность при нейтральном pH также наблюдалась в предыдущих исследованиях [18, 40, 42]. Адсорбция на поверхности MUA в других исследованиях может быть объяснена присутствием положительно заряженных доменов (лизин, гистидин) на поверхности BSA. В предыдущем исследовании [43] прикрепление альбумина сыворотки человека (HSA) к отрицательно заряженным поверхностям наблюдалось при нейтральном pH. Увеличение pK _a карбоксильной функциональной группы при адсорбции на плотно упакованной поверхности SAM может приводить к протонированию групп с концевыми карбоксильными группами при нейтральном pH, что приводит к сильным взаимодействиям водородных связей с белками BSA [43, 45 , 46].Обнаружение гидрофобных участков алкильных цепей из-за неупорядоченных SAM MUA может способствовать адсорбции BSA на этой поверхности [43]. Большая адсорбция БСА на положительно заряженной поверхности может быть объяснена сильными электростатическими взаимодействиями между поверхностью AUT и белками БСА.

Среди всех исследованных SAM, MUOH показал наименьшую адсорбцию BSA, что согласуется с предыдущими исследованиями по оценке адсорбции BSA на концевых поверхностях OH [40, 41]. Адсорбция БСА на MUOH составила (0.143 ± 0,005) мкг / см ² (таблица S1), что хорошо согласуется со значением 0,19 мкг / см ² , сообщенным в исследовании Фриды адсорбции БСА на MUOH на Au через 50 мин [2]. Однако процесс адсорбции BSA в исследовании Фриды продолжает выравниваться через 50 минут, в то время как адсорбция BSA на MUOH в этом исследовании достигает насыщения после 1 минуты введения BSA в жидкую ячейку (рис. 3B) [2]. В этом исследовании было обнаружено, что количество адсорбции БСА уменьшается в порядке –NH ₂ ≥ –COOH> –CH ₃ > –OH, что согласуется с предыдущим исследованием, в котором положительно заряженные SAM поверхности показали большую адсорбцию БСА, чем отрицательно заряженные поверхности, и большая адсорбция БСА наблюдалась на гидрофобных поверхностях [40, 42].

Заряженные поверхности имели большую плотность упаковки BSA по сравнению с нейтральными поверхностями (рис. 2B). Этот вывод согласуется с предыдущим исследованием, продемонстрировавшим, что SAM MUA образуют компактный монослой, в то время как SAM DT10 представляют в основном однородные, но менее компактные области на изображениях сканирующей туннельной микроскопии [36]. Плотно упакованный монослой MUA по сравнению с DT10, вероятно, является причиной более высокой плотности молекул BSA на MUA, учитывая, что доступно больше сайтов связывания. Аналогичное объяснение можно применить для алкантиолов с концевыми аминогруппами и гидроксильными группами, однако необходимы дополнительные исследования.В общем, рис. 2B подразумевает, что белки BSA свободно упакованы на нейтральных поверхностях, тогда как на заряженных поверхностях происходит увеличение упаковки.

Измеренная толщина (d _SE и d _QCMD ) адсорбции BSA на MUOH и DT10 не прямо пропорциональна объемной доле (рис. 2). Хотя DT10 имеет более высокую d _SE , больше окружающего растворителя было захвачено в присоединенные белки, что привело к более высокой d _QCMD . Для адсорбции BSA на MUA и AUT вполне вероятно, что во время процесса адсорбции BSA, адсорбированный на субстрате MUA, захватил больше окружающего растворителя по сравнению с AUT, что привело к наблюдению более низкой объемной доли на MUA.

Благодаря своей трехмерной форме, молекулы BSA могут располагаться бок о бок или по бокам [14, 21] (рис. 7). BSA имеет приблизительные размеры 4 нм x 4 нм x 14 нм в водном растворе [29], поэтому толщина монослоя BSA должна составлять 4 нм в параллельном сценарии и 14 нм в конечном сценарии. Для бокового сценария молекула BSA занимает площадь приблизительно 56 нм ² , что приводит к максимальной плотности 2,75 x 10 ¹² молекул BSA на датчик при условии, что площадь сенсора, доступная для присоединения, составляет 154 мм ² .Для сценария «конец вперед» молекула BSA занимает площадь 16 нм ² , что соответствует 9,63 x10 ¹² молекул BSA на датчик. Было замечено, что среднее количество осажденных молекул BSA, измеренное на поверхностях MUA и AUT SAM, было немного больше, чем максимальное количество молекул BSA в параллельном сценарии и примерно в три раза ниже в конечном сценарии (таблица S1). Следует отметить, что QCM-D / SE определяет среднюю толщину тонкой пленки на поверхности Au.Следовательно, если SAMs не были идеально упакованы, например, с участками SAM, ориентированными с разным вращением или загрязнителями, блокирующими потенциальные сайты хемосорбции [31], прикрепление молекул BSA было бы неполным, что привело бы к более низким, чем ожидалось, значениям d _QCMD . Кроме того, поскольку измеренная толщина адсорбционного слоя BSA была больше 4,0 нм (рис. 7 и таблица S1), конечный сценарий может быть вероятным вариантом для адсорбции BSA на MUA и AUT. Для поверхностей MUOH и DT10 возможны оба сценария (рис. 7), поскольку максимальное количество молекул BSA было в 2–16 раз больше, чем измеренное количество молекул BSA, а измеренная толщина была меньше 4.0 нм (рис. 7 и таблица S1). Сценарии расположения BSA в виде монослоя дополнительно подтверждаются предыдущим исследованием, согласно которому агрегация BSA не наблюдалась (отсутствие расширения гидродинамического диаметра BSA) при концентрации BSA 1,0 мг / мл при комнатной температуре [5].

Скорость адсорбции BSA как функция свойств поверхности и концентрации BSA

Двухфазная адсорбция БСА на поверхности ПАМ в водном растворе также наблюдалась в предыдущих исследованиях [6, 27, 31, 41]. Первая фаза произошла, когда раствор BSA первоначально контактировал с избыточными участками сорбции на SAM.Вторая фаза затем протекала медленнее, пока не достигла плато, так как большинство сайтов связывания занято в первой фазе, и однородность монослоя улучшается за счет упорядочения и упаковки молекул в этой фазе [31]. Начальная скорость адсорбции BSA была наибольшей на положительно заряженной гидрофильной поверхности AUT (рис. 5A). Наименьшее сродство было к нейтральной гидрофобной поверхности DT10 (фиг. 5A). Тенденция начальной скорости адсорбции согласуется с тенденцией как объемной доли, так и адсорбированной поверхностной массы (таблица S1).Можно предположить, что электростатические взаимодействия, ответственные за адсорбцию BSA на положительно заряженных поверхностях AUT, сильнее, чем гидрофобное взаимодействие между BSA и гидрофобной поверхностью DT10.

Общая скорость адсорбции BSA на нейтральных поверхностях MUOH и DT10 была сопоставима и была ниже, чем общая скорость адсорбции BSA на заряженных поверхностях AUT и MUA. Эти результаты предполагают, что более высокие начальные скорости адсорбции БСА наблюдаются на поверхностях –NH ₂ и –COOH, что подтверждается предыдущим открытием [40].

Несмотря на сравнимую площадь адсорбированной поверхностной массы БСА в равновесии на AUT и MUA (таблица S1), начальные скорости адсорбции были заметно выше для AUT, чем для MUA (рис. 5), что позволяет предположить, что тип SAM может быть контролирующим компонентом в начальной фазе адсорбции и, следовательно, играть критическая роль в однородности монослоя.

Взаимодействие БСА с поверхностью в зависимости от концентрации БСА

Адсорбция BSA

увеличивалась с увеличением концентрации белка в диапазоне от 0.1–1,0 мкг / мл. Концентрации раствора БСА 1,0 мкг / мл и 1000 мкг / мл не показали разницы в адсорбированном БСА, что указывает на то, что адсорбция БСА была при насыщении (таблица S1). При концентрациях ниже 0,1 мкг / мл комбинаторный in-situ QCM-D / SE не может обнаружить адсорбцию. Мы наблюдали, что при высоких концентрациях BSA (1000 мкг / мл) была измерена более высокая объемная доля по сравнению с более низкими концентрациями (0,1–1,0 мкг / мл) (рис. 4B). Меньшее количество молекул БСА привело к более рыхлой упаковке на поверхности SAM.Когда в растворе было больше молекул BSA, было занято больше сайтов связывания, что приводило к более высокой объемной доле адсорбата.

Влияние pH на адсорбцию BSA

Адсорбция / десорбция BSA

в AUT зависела от pH раствора. Поскольку BSA отрицательно заряжен при нейтральном pH, молекулы BSA будут электростатически адсорбироваться на положительно заряженном AUT SAM. Напротив, электростатическое отталкивание между положительно заряженным субстратом AUT и положительно заряженным BSA может препятствовать связыванию белка с поверхностью AUT при pH 2, что приводит к десорбции BSA [6] (рис. 6).При pH 2 молекулы BSA сворачиваются и выставляют гидрофобные части молекул на поверхность AUT, что приводит к десорбции с поверхности. Поскольку адсорбированные молекулы BSA были полностью удалены после фазы промывки при pH 2 (f _{o, V} ~ 0), мы полагаем, что положительный сигнал QCM-D может быть связан с десорбцией молекул BSA на поверхности AUT.

Выводы

Кинетическая адсорбция BSA на различных поверхностях SAM была оценена с использованием комбинаторного QCM-D / SE in-situ.Адсорбция BSA варьируется в зависимости от свойств поверхности, концентрации BSA и pH. Адсорбция БСА на исследуемых SAM представляет собой двухфазный процесс, в котором начальная скорость адсорбции является наибольшей для положительно заряженной гидрофильной поверхности AUT и наименьшей для нейтральной гидрофобной поверхности DT10. Большее количество молекул BSA, большая толщина тонкопленочного слоя BSA и более плотно упакованные молекулы BSA встречаются на заряженных поверхностях по сравнению с нейтральными поверхностями. И отрицательно, и положительно заряженные поверхности имеют одинаковую адсорбцию с точки зрения толщины пленки, количества адсорбированного БСА и пористости тонкой пленки.Однако начальная кинетическая скорость адсорбции БСА для положительно заряженной поверхности выше, чем для отрицательно заряженной поверхности. Плотность адсорбированного БСА зависит от молекулярной структуры функциональной группы свободного хвоста SAM, которая наблюдалась как сильно упакованная для –COOH и –NH ₂ и менее плотная для –CH ₃ и –OH. Гидрофобные взаимодействия и водородные связи ответственны за адсорбцию BSA на гидрофобных поверхностях DT10 и нейтральных MUOH, соответственно, в то время как комбинация электростатических и гидрофобных взаимодействий участвует в адсорбции BSA на заряженных поверхностях AUT и MUA.Количество адсорбированных молекул БСА на поверхности АУ увеличивалось при увеличении концентрации БСА. В исследовании было подтверждено, что адсорбированные молекулы БСА десорбируются при водном pH ниже, чем его IEP.

Дополнительная информация

S2 Рис. Толщина BSA на поверхности Au с покрытием AUT в зависимости от концентрации BSA.

d _SE : толщина SE, d _QCMD : толщина QCM-D, и f _{o, V} : объемная доля адсорбата. (A) 1,0 мкг / мл с дополнительной фазой ополаскивания с pH 2 после фазы ополаскивания ДИ водой; (В) 0.5 мкг / мл; и (C) 0,1 мкг / мл.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0141282.s002

(TIF)

S1 Таблица. Сводка результатов измерений и расчетов с соответствующими стандартными ошибками.

d _SE : толщина SE; d _QCMD : толщина QCM-D; Δm _SE : поверхностные изменения массы адсорбата SE; Δm _QCMD : поверхностные изменения массы адсорбата QCM-D; и f _{o, V} : объемная доля адсорбата.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0141282.s004

(PDF)

Благодарности

Авторы выражают благодарность доктору Тадасу Капутису за подготовку протокола SAM.

Вклад авторов

Задумал и спроектировал эксперименты: HP SB KR MS JB. Проведены эксперименты: HP KR. Проанализированы данные: HP SB KR MS JB. Внесенные реагенты / материалы / инструменты анализа: SB MS. Написал документ: HP SB KR MS JB.

Ссылки

1. 1.
   Horbett TA, Brash JL.Белки на интерфейсах. II. Основы и приложения. Горбетт Т.А., Браш Дж.Л., редакторы. Вашингтон, округ Колумбия: Американское химическое общество; 1995.
2. 2.
   Йернстрём Ф. Самособирающиеся монослои алкантиолов: исследование состава поверхности, смачиваемости и адсорбции белков и пептидов Уппсала: инженерная школа Упсальского университета; 2001.
3. 3.
   Servagent-Noinville S, Revault M, Quiquampoix H, Baron MH. Конформационные изменения бычьего сывороточного альбумина, вызванные адсорбцией на различных поверхностях глины: FTIR-анализ.Журнал коллоидной и интерфейсной науки. 2000. 221 (2): 273–83. WOS: 000084997300019. pmid: 10631031
4. 4.
   Копач Т., Бозгейик К., Йенер Дж. Влияние pH и температуры на адсорбцию бычьего сывороточного альбумина на диоксиде титана. Коллоиды и поверхности a-Физико-химические и инженерные аспекты. 2008. 322 (1–3): 19–28. WOS: 000257129300004.
5. 5.
   Йоханнес Г., Видмер С.К., Эломаа М., Юссила М., Асеев В., Риеккола М.Л. Термическая агрегация бычьего сывороточного альбумина изучалась методом асимметричного потокового полевого фракционирования.Analytica Chimica Acta. 2010. 675 (2): 191–8. WOS: 000281746400013. pmid: 20800732
6. 6.
   Алкан М., Демирбас О., Доган М., Арслан О. Поверхностные свойства бычьего сывороточного альбумина — адсорбированные оксиды: адсорбция, кинетика адсорбции и электрокинетические свойства. Микропористые и мезопористые материалы. 2006. 96 (1–3): 331–40. WOS: 000242229200044.
7. 7.
   Баджпай АК. Адсорбция бычьего сывороточного альбумина на стеклянные порошковые поверхности, покрытые поливиниловым спиртом. Журнал прикладной науки о полимерах.2000. 78 (5): 933–40. WOS: 0000800001.
8. 8.
   Norde W. Адсорбция белка на твердых поверхностях — термодинамический подход. Чистая и прикладная химия. 1994. 66 (3): 491–6. WOS: A1994NL19800021.
9. 9.
   Sun SD, Yue YL, Huang XH, Meng DY. Адсорбция белка на мембранах, контактирующих с кровью. Журнал мембрановедения. 2003. 222 (1–2): 3–18. WOS: 000185568000001.
10. 10.
    Олива Ф.Й., Авалле Л.Б., Камара, штат Орегон, Де Паули, CP. Адсорбция человеческого сывороточного альбумина (HSA) на коллоидных частицах TiO2, Часть I.Журнал коллоидной и интерфейсной науки. 2003. 261 (2): 299–311. WOS: 000182896400012. pmid: 16256535
11. 11.
    Зейтц Р., Брингс Р., Гейгер Р. Адсорбция белка на границах раздела твердое тело-жидкость, контролируемая с помощью лазерной эллипсометрии. Прикладная наука о поверхности. 2005. 252 (1): 154–7. WOS: 000232173

    9.

12. 12.
    Роуч П., Фаррар Д., Перри С.К. Интерпретация адсорбции белка: поверхностные конформационные изменения. Журнал Американского химического общества. 2005. 127 (22): 8168–73.WOS: 000229619500055. pmid: 15926845
13. 13.
    Норде В. Белки на твердых поверхностях. В: Norde W, Baszkin A, ред. Физическая химия биологических интерфейсов. Нью-Йорк: Марсель Деккер Инк .; 2000. с. 115.
14. 14.
    Рабе М., Вердес Д., Сигер С. Понимание явления адсорбции белка на твердых поверхностях. Достижения в коллоидной и интерфейсной науке. 2011. 162 (1–2): 87–106. WOS: 000288638400007. pmid: 21295764
15. 15.
    Биттрих Э.Р., К.Б. Эйххорн К.Дж. Хофманн, Т., Шуберт, М., Штамм, М. Ульманн, П. Адсорбция белка и набухание полиэлектролитных щеток: одновременное исследование микровесов эллипсометрии и кристалла кварца. Биоинтерфазы. 2010. 5 (4): 159–67. pmid: 21219037
16. 16.
    Кениг М., Каспутис Т., Шмидт Д., Роденхаузен КБ, Эйххорн К.Дж., Панье А.К. и др. Комбинированный QCM-D / GE в качестве инструмента для характеристики набухания и адсорбции белка на полимерных щетках, привитых на 3D-наноструктуры. Аналитическая и биоаналитическая химия.2014. 406 (28): 7233–42. WOS: 000344320300017. pmid: 25240934
17. 17.
    Кениг М., Роденхаузен К.Б., Шмидт Д., Эйххорн К.Дж., Шуберт М., Штамм М. и др. Синтез на месте наночастиц палладия в полимерных щетках с последующим QCM-D в сочетании со спектроскопической эллипсометрией. Характеристика частиц и систем частиц. 2013; 30 (11): 931–5. WOS: 000327250700005.
18. 18.
    Кудельски А. Влияние электростатически связанных белков на структуру монослоев сцепления: адсорбция бычьего сывороточного альбумина на серебряных и золотых подложках, покрытых монослоями 2-меркаптоэтансульфоната.Колебательная спектроскопия. 2003. 33 (1–2): 197–204. WOS: 000187359

    9.

19. 19.
    Wassell DTH, Embery G. Адсорбция бычьего сывороточного альбумина на титановом порошке. Биоматериалы. 1996. 17 (9): 859–64. WOS: A1996UH70

    2. pmid: 8718930

20. 20.
    Сирахама Х, Такеда К., Сузава Т. Адсорбция бычьего сывороточного альбумина на латекс полистирола — эффекты сосуществующих анионов электролита. Журнал коллоидной и интерфейсной науки. 1986. 109 (2): 552–6. WOS: A1986AZJ8400029.
21. 21.McClellan SJ, Franses EI. Влияние концентрации и денатурации на адсорбцию и поверхностное натяжение бычьего сывороточного альбумина. Коллоиды и поверхности B-биоинтерфейсы. 2003. 28 (1): 63–75. WOS: 000181235000007.
22. 22.
    Майорек К.А., Поребски П.Дж., Дайал А., Циммерман М.Д., Яблонска К., Стюарт А.Дж. и др. Структурная и иммунологическая характеристика альбуминов сыворотки крупного рогатого скота, лошади и кролика. Молекулярная иммунология. 2012. 52 (3–4): 174–82. WOS: 000307489800010. pmid: 22677715
23. 23.Каспутис Т., Пипер А., Шуберт М., Панье А.К. Динамический анализ иммобилизации наночастиц ДНК на модельных субстратах биоматериала с использованием комбинаторной спектроскопической эллипсометрии и кварцевых микровесов с диссипацией. Тонкие твердые пленки. 2014. 571 (3): 637–43.
24. 24.
    Чонг KSL, Sun SQ, Leggett GJ. Измерение кинетики фотоокисления самоорганизованных монослоев с помощью микроскопии силы трения. Ленгмюра. 2005. 21 (9): 3903–9. WOS: 0002285_{027. pmid: 15835953}
25. 25.Лав JC, Estroff LA, Kriebel JK, Nuzzo RG, Whitesides GM. Самоорганизующиеся монослои тиолатов на металлах как форма нанотехнологии. Химические обзоры. 2005. 105 (4): 1103–69. WOS: 000228412800003. pmid: 15826011
26. 26.
    Брэдфорд Д.К., Хаттер Э., Фендлер Дж. Х., Рой Д. Инфракрасная эллипсометрия с улучшенной поверхностью самоорганизующихся монослоев ундекантиола и додекантиола на неупорядоченных золотых наноостровках. Журнал физической химии Б. 2005; 109 (44): 20914–22. WOS: 000233342400038.
27. 27.
    Каспутис Т., Пипер А., Шуберт М., Панье А.К. Динамический анализ иммобилизации наночастиц ДНК на модельных субстратах биоматериала с использованием комбинаторной спектроскопической эллипсометрии и кварцевых микровесов с диссипацией. Тонкие твердые пленки. 2014.
28. 28.
    Whitesides GM, Laibinis PE. Влажные химические подходы к характеристике органических поверхностей — самоорганизующиеся монослои, смачивание и физическая органическая химия границы раздела твердых тел и жидкости.Ленгмюра. 1990. 6 (1): 87–96. WOS: A1990CM08600015.
29. 29.
    Peters TJ. Все об альбумине: биохимия, генетика и медицинские приложения. Сан-Диего, Калифорния: Academic Press; 1996.
30. 30.
    Роденхаузен К.Б., Шуберт М. Подход виртуального разделения для исследования пористых ультратонких пленок с помощью комбинированных методов спектроскопической эллипсометрии и микровесов на кристаллах кварца. Тонкие твердые пленки. 2011. 519 (9): 2772–6. WOS: 000289174200044.
31. 31.
    Роденхаузен К.Б., Дюнзинг Б.А., Каспутис Т., Панье А.К., Хофманн Т., Шуберт М. и др. Мониторинг самосборной монослойной хемосорбции алкантиола на месте с помощью комбинированных методов спектроскопической эллипсометрии и микровесов на кристаллах кварца. Тонкие твердые пленки. 2011; 519 (9): 2817–20. WOS: 000289174200053.
32. 32.
    Роденхаузен К.Б., Каспутис Т., Паньер А.К., Герасимов Ю.Ю., Лай Р.Ю., Солинский М. и др. Комбинированный оптический и акустический метод определения толщины и пористости прозрачных органических слоев ниже предела ультратонких пленок. Обзор научных инструментов.2011; 82.
33. 33.
    Чен К.Л., Элимелех М. Кинетика агрегации и осаждения наночастиц фуллерена (C60). Ленгмюра. 2006; 22: 10994–1001. pmid: 17154576
34. 34.
    Ульман А. Формирование и структура самоорганизующихся монослоев. Химические обзоры. 1996. 96 (4): 1533–54. WOS: A1996UU36100017. pmid: 11848802
35. 35.
    Димилла PA, Folkers JP, Бибайк HA, Хартер R, Лопес GP, Whitesides GM. Смачивание и адсорбция белков самоорганизующихся монослоев алкантиолатов, нанесенных на прозрачные пленки золота.Журнал Американского химического общества. 1994. 116 (5): 2225–6. WOS: A1994NB16

    5.

36. 36.
    Мендоза С.М., Арфауи И., Занарини С., Паолуччи Ф., Рудольф П. Улучшения в характеристике кристаллической структуры самоорганизующихся монослоев алкантиола с концевыми кислотными группами на Au (111). Ленгмюра. 2007. 23 (2): 582–8. WOS: 000243338500038. pmid: 17209609
37. 37.
    Bain CD, Troughton EB, Tao YT, Evall J, Whitesides GM, Nuzzo RG. Формирование однослойных пленок спонтанной сборкой органических тиолов из раствора на золоте.Журнал Американского химического общества. 1989. 111 (1): 321–35. WOS: A1989R647200049.
38. 38.
    Роденхаузен К.Б., Шмидт Д., Каспутис Т., Панье А.К., Шуберт Э., Шуберт М. Обобщенная эллипсометрия на месте количественного определения прикрепления органического адсорбата в наклонных столбчатых тонких пленках. Оптика Экспресс. 2012; 20 (5): 5419. pmid: 22418349
39. 39.
    Каспутис Т., Кениг М., Шмидт Д., Секора Д., Роденхаузен КБ, Эйххорн К.Дж. и др. Наклонные столбчатые тонкие пленки, полученные осаждением под скользящим углом, функционализированные с помощью кистей из полимера полиакриловой кислоты.Журнал физической химии C. 2013; 117 (27): 13971–80. WOS: 000321883600024.
40. 40.
    Контрерас А.Е., Штайнер З., Мяо Дж., Кашер Р., Ли QL. Изучение роли общих функций поверхности мембраны в адсорбции и очистке органических загрязнителей с помощью QCM-D. Наука об окружающей среде и технологии. 2011. 45 (15): 6309–15. WOS: 000293196400019.
41. 41.
    Сигал Г.Б., Мрксич М., Уайтсайдс Г.М. Влияние смачиваемости поверхности на адсорбцию белков и детергентов.Журнал Американского химического общества. 1998. 120 (14): 3464–73. WOS: 000073179200024.
42. 42.
    Анзай Дж, Го Б., Оса Т. Кварцево-кристаллические микровесы и циклические вольтамперометрические исследования адсорбционного поведения сывороточного альбумина на самоорганизованных тиоловых монослоях, обладающих различной гидрофобностью и полярностью. Биоэлектрохимия и биоэнергетика. 1996. 40 (1): 35–40. WOS: A1996UX07000006.
43. 43.
    Барретт Д.А., GM Power, Хуссейн М.А., Питфилд И.Д., Шоу П.Н., Дэвис М.С.Взаимодействие белков с модельными хроматографическими неподвижными фазами, построенными с использованием самоорганизующихся монослоев. Журнал сепарационной науки. 2005. 28 (5): 483–91. WOS: 000228220600010. pmid: 15835737
44. 44.
    Hourrigan JL, Klingsporn AL. Скрапи: Исследования по вертикальной и горизонтальной передаче. В: Гиббс CJ, редактор. Губчатая энцефалопатия. Нью-Йорк: Springer New York; 1996. стр. 59–83.
45. 45.
    Смит Д.А., Уоллворк М.Л., Чжан Дж., Киркхэм Дж., Робинсон С., Марш М. и др.Влияние концентрации электролита на поведение химического силового титрования ω-функционализированных SAM: свидетельства образования прочных ионных водородных связей. J. Phys Chem. 2000; 104: 8862–70.
46. 46.
    Чжан Дж., Киркхэм Дж., Робинсон С., Уоллворк М.Л., Смит Д.А., Марш А. и др. Определение состояния ионизации 11-тиоундецил-1-фосфоновой кислоты в самоорганизующихся монослоях методом химической силовой микроскопии. Аналитическая химия. 2000. 72 (9): 1973–8. WOS: 000086927300014. pmid: 10815953

Анализ общего органического углерода (TOC) образцов фармацевтической очистки для валидации — 9 ноября 2016 г. — Джон Уэлш — Новости экологической науки Статьи

Анализ общего органического углерода (TOC) обеспечивает быстрый и эффективный аналитический процесс для валидации очистки в фармацевтической промышленности.Когда одно оборудование на фармацевтическом производственном предприятии обрабатывает различные активные фармацевтические ингредиенты (АФИ), перекрестное загрязнение между продуктами должно быть сведено к абсолютному минимуму. Валидация очистки — это общий процесс, который гарантирует, что процессы и процедуры очистки оборудования удаляют остатки продуктов и чистящих средств до заданных уровней приемлемости, как того требует 21 CFR 211.67, который гласит, что « оборудование и посуда должны очищаться, обслуживаться и дезинфицироваться в соответствующих интервалы для предотвращения неисправностей или загрязнения, которые могут повлиять на безопасность, идентичность, силу, качество или чистоту лекарственного препарата сверх официальных или других установленных требований »1.

Экспериментальный

Разработка процедуры валидации очистки
Во время разработки процедуры валидации очистки ключевой задачей является валидация процесса: подтверждение с помощью аналитических данных того, что на каждом этапе процесса остатки продукта и чистящего средства удаляются до заранее определенных уровней приемлемости. Руководящие принципы FDA 1993 г. требуют, чтобы основание любых допустимых пределов было «научно обоснованным». Эти ограничения различаются в зависимости от типа используемой процедуры очистки (например, очистка на месте (CIP) или очистка вне места (COP)) и от того, выполняется ли процедура очистки между партиями одного и того же продукта или для изменения типов продуктов.Также важно понимать, какие типы аналитов и остатков чистящих средств проверяют пользователи (например, образцы белкового ферментационного бульона и катионные поверхностно-активные вещества). Эти параметры определяют метод обнаружения для процедуры проверки.

Анализ ТОС для валидации очистки

Анализ

TOC быстро становится предпочтительным аналитическим методом для валидации очистки по нескольким причинам. Многие фармацевтические компании разрабатывают методы валидации очистки, основанные на подходе к общему продукту: определяется, присутствует ли какой-либо остаток независимо от его происхождения (включая продукты, моющие средства, химические вещества, растворители, побочные продукты, продукты разложения и микробные загрязнители. ).Этот метод хорошо работает с анализом TOC, который может обнаруживать любые остатки API или чистящего средства, которые содержат углерод в своей молекулярной структуре.
Jenkins et al. 2 нашел сильную поддержку использования анализа ТОС при валидации очистки: «ТОС имеет низкое обнаружение, быстрое время анализа, низкую стоимость по сравнению с другими методами и может обнаруживать все остатки на основе углерода». Сравнивая ТОС, ВЭЖХ, тонкослойную хроматографию, спектрофотометрический (УФ), иммуноферментный анализ, электрофорез, pH, проводимость и визуальный анализ, они обнаружили, что анализ ТОС работает так же или лучше, чем ВЭЖХ и спектрофометрические методы.
Другие причины увеличения использования анализа ТОС включают:

• Относительно низкие начальные капитальные затраты, а также затраты на эксплуатацию и техническое обслуживание
• Простота использования
• Высокая чувствительность
• Высокое извлечение устойчивых аналитов
• Минимальные помехи

Методология

Тестирование аналитической методики на стадии разработки
с модельным соединением (соединениями), которое является репрезентативным для типов активных агентов, встречающихся в фактическом процессе валидации очистки, продемонстрирует надежность, точность и прецизионность
техника.

Альбумин бычьей сыворотки

Бычий сывороточный альбумин (BSA) — это соединение, которое может служить хорошей моделью для других белковых, трудноокисляемых API. Сывороточный альбумин, белок, распространенный во всей плазме крови млекопитающих, является одним из наиболее широко известных и тщательно изученных белков. БСА, в частности, был охарактеризован методами HNMR и рентгеновской кристаллографии как имеющий примерно сердечную форму с 607 аминокислотными остатками и молекулярную массу приблизительно 66 317,25 а.е.м. 3. БСА, широко используемый в фармацевтической промышленности в качестве самого активного агента, также является хорошей моделью. состав для разработки надежного аналитического метода проверки очистки.Белки, как известно, трудно окисляются, и когда метод определения ТОС разработан с использованием белкового соединения в качестве тестируемого агента, аналитические результаты могут быть с высокой степенью уверенности, поскольку они относятся к другим активным агентам и менее устойчивым к окислению аналитам.

Оборудование

Целью этого исследования было определение линейного диапазона отклика анализатора ТОС с использованием BSA в качестве модельного соединения для разработки методологии валидации очистки. В этом исследовании использовались анализатор TOC OI Analytical Aurora 1030W и автосэмплер 1088 (рис. 1).

Приготовление раствора

Лиофилизированный порошок

BSA (Bio-Plus Laboratories) регидратировали с использованием воды с реагентом в соответствии с инструкциями по приготовлению исходного / рабочего маточного раствора (100 мг / л углерода). Образцы БСА готовили разбавлением рабочего раствора угля. Из-за белковой природы BSA важно минимальное встряхивание исходных стандартов, так как они будут прилипать к другим частям стеклянной посуды и уменьшать извлечение. Мерная колба должна быть почти заполнена деионизированной водой перед добавлением BSA для разбавления.Смешивание следует производить только непосредственно перед анализом.
Анализатор TOC был откалиброван с использованием гидрофталата калия (C9HO4K) или KHP. Предварительно приготовленный исходный исходный раствор углерода с концентрацией 1000 мг / л разбавляли реагентной водой, чтобы приготовить рабочий исходный раствор (100 мг / л C). Стандарты готовили разбавлением рабочего раствора.
Для переваривания TIC в образцах в качестве кислотного реагента готовили 5% фосфорную кислоту (h4PO4). Окислитель ТОС получали растворением 200 г персульфата натрия (Na2SO8) в 1 л воды с реагентом.Анализатор TOC был запрограммирован с параметрами метода, перечисленными в таблице 1 для анализа BSA.
Образцы были проанализированы в трех экземплярах (9 мл на повтор), и данные были представлены в виде количества площадей, массы углерода (мкг С) и концентрации углерода (мг / л) на повтор и на образец. Представленные статистические данные включают стандартное отклонение выборки и относительное стандартное отклонение в процентах.

Результаты

Калибровочная кривая
Калибровочная кривая, использованная в этом исследовании (рис. 2), демонстрирует возможность калибровки анализатора Aurora 1030W TOC в относительно широком диапазоне концентраций углерода с высокой точностью и точностью.Прибор был откалиброван с использованием широко используемого и легко окисляемого стандарта KHP. Калибровочная кривая на рисунке 2 была построена с использованием программного обеспечения для ПК, которое является копией программного обеспечения для сенсорного экрана, доступного с Aurora 1030W. Фактор отклика представляет отклик прибора в единицах мкг C на 1000 отсчетов площади.

Результаты испытаний

Целью данного исследования было определение линейного диапазона отклика анализатора ТОС 1030W на BSA. Эта концепция аналогична калибровке прибора и показывает рабочий диапазон концентраций BSA, при котором прибор дает линейный отклик.Результаты испытаний представлены на рисунке 3 в виде графика зависимости концентрации BSA на образец от реакции анализатора TOC при подсчете площадей. Данные показывают, что Aurora 1030W может анализировать BSA от 0,5 до 20 ppm.
В других исследованиях было показано, что как белок с трудом окисляемый, BSA имеет плохое восстановление и реакцию инструментов. Эти данные демонстрируют, что технология окисления нагретого персульфата способна полностью переваривать и полностью восстанавливать углерод в образцах BSA в широком рабочем диапазоне.Аналогичный график с кривой наилучшего соответствия второго порядка мог бы указывать на прибор с неполным извлечением BSA. В этих случаях данные часто представляют собой верхний предел устойчивости анализатора к перевариванию BSA; по мере увеличения концентрации пробы отклик прибора остается относительно неизменным.
Таблица 2 также демонстрирует точность, достижимую с помощью Aurora 1030W при анализе белковых проб, таких как BSA. Для анализа были приготовлены образцы с известными концентрациями BSA.Исходя из этого, можно рассчитать теоретическую концентрацию углерода и сравнить ее с измеренной концентрацией углерода. Исходя из молекулярной массы BSA, равной 66 317,25 а.е.м., и процентного содержания углерода по массе 53,065%, можно соотнести концентрацию углерода с концентрацией BSA по следующей формуле:

частей на миллион C = частей на миллион BSA • 53.065
100

Данные показывают способность технологии нагретого персульфата анализировать образцы БСА с высокой точностью (2.5% средний процент RSD) и точности (средний процент восстановления 87%).
Определение надлежащего извлечения углерода является необходимостью при валидации очистки. Чтобы получить точную оценку восстановления системы, необходимо определить наклон теоретической концентрации по сравнению с фактической. На Рисунке 4 показаны извлечения BSA, определенные в Таблице 2, и получен наклон.
Поскольку ожидается, что теоретическое содержание углерода в BSA составит 53,065%, мы можем рассчитать фактическое содержание углерода на основе следующего уравнения:

Теоретическая концентрация ТОС = Фактическая концентрация ТОС;
Уклон трассы
для BSA, 53.065 = 46,8896% углерода.
1,1317
Понимая извлечение, которое будет достигнуто анализатором, можно установить подходящий диапазон для будущих запусков для определения содержания BSA в неизвестных образцах.
Резюме и выводы
Разработка общей методологии валидации очистки — это существенная и детальная операция; аналитический метод, используемый для обнаружения остатков, составляет лишь небольшую часть. Используя BSA в качестве модельного аналита, который хорошо охарактеризован и представляет собой одно из наиболее трудно поддающихся окислению соединений, обнаруженных в фармацевтической промышленности, это исследование показало, что анализатор TOC Aurora 1030 хорошо подходит для лабораторного анализа очистки на месте и уборка —
штатные образцы.
Технология окисления персульфата с подогревом и обнаружение NDIR, используемые в Aurora 1030W, в сочетании с такими функциями, как программное обеспечение, соответствующее 21 CFR Part 11, и встроенная программа создания отчетов, в совокупности обеспечивают фармацевтическую промышленность анализатором TOC, который аналитики могут использовать с высокой степень уверенности в проверке чистоты.

Список литературы

1. «Текущие правила надлежащей производственной практики», Свод федеральных правил, раздел 21, Продукты питания и лекарственные препараты (Управление общего обслуживания, Вашингтон, округ Колумбия).C., 1 апреля 1973 г.), Часть 211.67.
2. Дженкинс, К. М. и др., «Применение анализа общего органического углерода для валидации очистки», PDA J. Pharm. Sci. & Тех. 50 (1), 6-15 (1996).
3. Картер, округ Колумбия; Хо, Дж. Х., «Структура сывороточного альбумина», Adv. Protein Chem. 1994, 45, 153–203.

Автозапчасти и автомобили S4339 Red Powder Coat Power Stop Performance Тормозные суппорты Другие тормоза для легковых и грузовых автомобилей lapino.pl

Автозапчасти и транспортные средства S4339 Red Powder Coat Power Stop Performance Тормозные суппорты Прочие Тормоза для легковых и грузовых автомобилей Lapino.pl

S4339 Red Powder Coat Power Stop Performance Тормозные суппорты, Performance тормозные суппорты S4339 Red Powder Coat Power Stop, Power Stop Performance Тормозные суппорты сочетаются с хорошими качествами, Комплект включает 2 передних суппорта, передние суппорты, восстановленный тормозной суппорт, номер детали Power Stop S4339, Тормозные суппорты Power Stop Performance, красное порошковое покрытие. Покрытие тормозных суппортов Power Stop Performance S4339 Красный порошок.

Ośrodek Wypoczynkowo — Szkoleniowy «Dorota»

Чапельск 51
83-050 Колбуды

тел.: +48 886 376 540
электронная почта: [email protected]

Банк Милениум:
37 1160 2202 0000 0000 4827 2285

S4339 Red Powder Coat Power Stop Performance Тормозные суппорты

Ожерелье из бусин «Подкова с 3 пасхальными яйцами»: Одежда, Купить женские хлопковые шорты и майки Bella из хлопка и спандекса, белые, средние и другие камзолы и майки в, Тисненый трехмерный дизайн космической капсулы подчеркивает мужской характер.мужская золотая роза роскошный дизайн тонкий крой с длинным рукавом стильная серебряная классическая рубашка с цветочным принтом мужская повседневная рубашка на пуговицах с коротким рукавом гавайская рубашка мужская рубашка с длинным рукавом хлопок льняная пляжная йога свободные топы новые мужские осенние повседневные твердые бедра свободная посадка флис с длинным рукавом блузка с капюшоном. Его можно сложить в действительно маленький компактный комбинезон, занимающий так мало места, но при этом он открывается для большей емкости. Одежда для альпинизма Jaylon Baby Romper Guitar Music Детский комбинезон с играми Bodysuit Creeper Onesies Белый: Одежда.Разработан для улучшения отклика дроссельной заслонки и улучшения звука двигателя. спальни или комнаты, где необходим запорный механизм. ABUS 110/155 Скрытая застежка на шарнирный штифт из закаленной стали (6-1 / 4 дюйма) — Аппаратные застежки — ткань премиум-класса обеспечивает максимальный комфорт, впитывает пот и сушит. fade, На обеих сторонах разъема есть гнездовые разъемы, поэтому вы можете подключить кабель к задней части. Classic Dome Tungsten Wedding Band.Мы прилагаем все усилия, чтобы предоставить клиентам удовлетворительное обслуживание. Использование легкого шелка делает ткань очаровательной, для более нового стиля моды и предметов высокого качества по разумным / достойным ценам. Привлекательные изображения с трафаретной печатью, длина до колен и уникальный принт: модные уникальные печатные узоры, отсутствие выцветания или потери формы; Внешний шов наших плавок до колен для вас. Купите Jofemuho Men Horns Buckle Winter с толстым флисовым пуховым пальто с капюшоном и другой альтернативой Down & Down в, Фотографии из реального продукта, штаб-квартира недалеко от Нэшвилла.

S4339 Red Powder Coat Power Stop Performance Тормозные суппорты

Honda CT 70 CT70 центральный штифт подножка ct70 70 90 z50 для более крупных двигателей, втулка 5-й передачи Honda Acura B16A GSR ITR, набор для Honda CRV 2015-16 Авто передний противотуманный свет / крышка лампы передний бампер LH&RH Моторное масло Крышка топливного бака Черная для Honda Acura Civic, 2 ЗАДНЕГО ЛЮКА ОПОРЫ ПОДЪЕМНИКА БАГАЖНИКА АМОРТИЗАТОРЫ СТРЕЛКИ РУКОЯТНИКИ ОПОРЫ ТЯГИ ДЕМПФЕР ХЭТЧБЕК, 5 «Coors Light Decal Наклейка Ящик для инструментов Hard Hat Бар для мобильного телефона Пивной грузовик, ТАХОЭ ЮКОН ПРИГОРОДНЫЙ ЧЕРНЫЙ ДРАЙВЕР СИДЕНЬЯ ПОЯСНИЧНАЯ РУЧКА 2015-2017 23462096.Пара надписей Bayliner Maxum 1800 SR для лодок 16 x 1 дюйм. NOS YAMAHA ПРОКЛАДКА ТОПЛИВНОГО БАКА MX YZ 80 125 250 360 400 TY 80 175 SC500 RT2 DT2, шпильки двигателя стеклоочистителя Morris & Leyland Clubman Mini 3. CAT 1P6441 .155 Толщина для ПРОКЛАДКИ Caterpillar. Подсветка номерного знака для Chevy Impala 2014-2016, 12 белых светодиодных ламп салона. Винтажный стиль Felix 1941 1942 1946 1947 1948 Chevrolet GM коллекционная шляпа, один новый оригинальный шланг сапуна картера двигателя 6030100370 для Mercedes MB. Комплект опор двигателя для передней и задней части Geo-Metro 1.3 л. OEM Chevrolet Camaro SS Левый водительский бампер ДХО дневные ходовые огни-вкладка отсутствует. Датчик педали акселератора для Honda Acura TL TSX 37971-RBB-003 2004-2008 гг. 2014 FORD FUSION NAVIGATION РУКОВОДСТВО ПОЛЬЗОВАТЕЛЯ S SE TITANIUM 2.5L 2.0 1.5L. Уплотнительное кольцо сливной пробки редуктора 60-3530 60-2640 BSA Triumph. Для проектора Nissan Maxima 04-06 черные сигнальные фары + черная решетка на капоте. Комплект коленвала Dodge 4.7L Dodge Ram Jeep Cherokee 1999-2007 гг. Литье # 53020683.ACDelco D1422D Замок зажигания. Chevrolet GM OEM 06-13 Impala Решетка переднего бампера — Лицензионный кронштейн 10337110,

S4339 Red Powder Coat Power Stop Performance Тормозные суппорты

S4339 Red Powder Coat Power Stop Performance Тормозные суппорты, S4339 Красный Powder Coat Power Stop Тормозные суппорты

Портится ли протеиновый порошок?

Не знаю, как вы, но я часто покупаю протеиновый порошок оптом, чтобы сэкономить. А это означает, что в какой-то момент у меня было слишком много протеинового порошка, и я начал задаваться вопросом: «А портится ли протеиновый порошок?».» Звучит знакомо?

Угадайте, вы не единственный, кто купил больше протеинового порошка, чем нужно .

Возможно, вы переоценили свои потребности или добавили больше белка в еду и сократили потребление протеиновых коктейлей. Или, возможно, вы выпали из вагона тренировки на несколько месяцев, и теперь вы хотите знать, подходят ли ваши запасы пищевых добавок для употребления.

Независимо от того, в какой сценарий вы попадаете, важно знать кое-что о хранении , сроке годности и признаках порчи протеиновых порошков .Читать дальше.

Ложки трех протеиновых порошков (из семян левого конопли, концентрата сыворотки, изолята сыворотки)

Как хранить протеиновый порошок

Самое важное правило хранения любого протеинового порошка — плотно закрывать контейнер . Многие протеиновые порошки выпускаются в больших пластиковых банках, которые легко открывать и закрывать. Если у вас есть один, вы можете оставить в нем порошок после открытия. Если он поставляется в непрозрачной упаковке, после вскрытия упаковки перенесите порошок в новый контейнер.

Я держу одну или две пустые банки протеинового порошка именно для этой цели.

Протеиновый порошок, как и почти любой другой порошок (например, мука), впитывает любую влагу, насколько может . И если на него попадет эта влага, образуются комки, и порошок испортится, если воды будет достаточно.

Совет

Единственная ситуация, когда вы хотите, чтобы протеиновый порошок контактировал с какой-либо жидкостью, — это приготовление протеинового коктейля.

Протеиновый порошок со вкусом шоколада

Как долго действует протеиновый порошок?

Есть много видов протеинового порошка.Сывороточный протеин, вероятно, самый популярный, но есть и другие популярные варианты, такие как казеин и яичный белок.

Есть также несколько веганских блюд. Соевый протеиновый порошок или смеси на растительной основе, которые обычно содержат протеины, извлеченные из гороха, коричневого риса и семян чиа.

К счастью для нас, срок годности каждого из них примерно одинаков.

На каждом контейнере протеинового порошка вы наверняка найдете дату, срок годности которой «не годится». Эта дата обычно составляет не менее года с даты изготовления.Обратите внимание, что это не срок годности. Он информирует вас, как долго продукт должен оставаться безупречного качества.

Можно с уверенностью предположить, что протеиновый порошок должен храниться в течение как минимум нескольких месяцев после даты, указанной на упаковке.

В большинстве случаев он будет съедобным (не испорченным) год или даже больше. Вы можете легко найти истории о людях, употреблявших старый протеиновый порошок. Порошок был через два-три года после даты изготовления, и встряски, которые они сделали, оказались очень хорошими.

Протеиновый порошок и протеиновый коктейль

Учтите еще одну вещь. В некоторые протеиновые порошки добавлены витамины, которые делают коктейли еще более полезными. Некоторые из этих витаминов со временем могут потерять свою силу . Это означает, что если вы съедите старый протеиновый порошок, вы не обеспечите свой организм всеми питательными веществами, которые может дать свежий протеиновый порошок.

После приготовления протеинового коктейля его следует использовать в течение 24 часов и хранить в холодильнике.

Конечно, срок хранения приготовленного коктейля зависит от многих факторов. Некоторые из них возникают, если вы использовали воду, молоко или другую жидкость в качестве жидкой основы для коктейля или если были добавлены другие ингредиенты.

Многие спортсмены готовят протеиновые коктейли перед тем, как отправиться в спортзал. Они оставляют их в раскаленной машине, пока они тренируются, и задаются вопросом, можно ли это сделать. На этот вопрос нет однозначного ответа. Лучший совет, который я могу вам дать в такой ситуации, — хранить порошкообразную и жидкую основу отдельно и смешивать их прямо перед употреблением коктейля .

Обратите внимание, что даты, указанные выше, являются приблизительными, и протеиновый порошок должен храниться намного дольше при правильном хранении.

Как определить, плохой ли протеиновый порошок

Вы ​​нашли контейнер с протеиновым порошком, срок хранения которого истек на несколько месяцев после даты, указанной на упаковке. Что делать?

Здесь нет ракетостроения.Начните с проверки внешнего вида порошка и его запаха. Если в порошок попадет влага, появятся влажные комки или даже плесень, а это значит, что вам следует выбросить его.